微生物学通报
微生物學通報
미생물학통보
MICROBIOLOGY
2003年
6期
73-76
,共4页
张惟材%李迎丽%张彦明%邓兵兵%黄留玉
張惟材%李迎麗%張彥明%鄧兵兵%黃留玉
장유재%리영려%장언명%산병병%황류옥
N-氨甲酰氨基酸水解酶%巴斯德毕赤酵母%基因表达
N-氨甲酰氨基痠水解酶%巴斯德畢赤酵母%基因錶達
N-안갑선안기산수해매%파사덕필적효모%기인표체
N-氨甲酰氨基酸水解酶是乙内酰脲酶系的组成部分,催化N-氨甲酰氨基酸水解为相应氨基酸.节杆菌BT801的N-氨甲酰氨基酸水解酶是该菌乙内酰脲酶系中惟一具立体专一性的酶,也是整个反应体系的限速酶.通过PCR从携带乙内酰脲酶系完整操纵子的亚克隆质粒pUC18-169上扩增得到N-氨甲酰氨基酸水解酶基因(hyu C)片段,连接到载体pPIC3.5K上,经BglⅡ酶切线性化,通过PEG法转化导入毕赤酵母GS115感受态细胞,利用G418抗性筛选得到插入多拷贝目的基因的转化子.酶活性分析表明所得转化子具有N-氨甲酰氨基酸水解酶活性,可将N-氨甲酰基苯丙氨酸水解为苯丙氨酸.
N-氨甲酰氨基痠水解酶是乙內酰脲酶繫的組成部分,催化N-氨甲酰氨基痠水解為相應氨基痠.節桿菌BT801的N-氨甲酰氨基痠水解酶是該菌乙內酰脲酶繫中惟一具立體專一性的酶,也是整箇反應體繫的限速酶.通過PCR從攜帶乙內酰脲酶繫完整操縱子的亞剋隆質粒pUC18-169上擴增得到N-氨甲酰氨基痠水解酶基因(hyu C)片段,連接到載體pPIC3.5K上,經BglⅡ酶切線性化,通過PEG法轉化導入畢赤酵母GS115感受態細胞,利用G418抗性篩選得到插入多拷貝目的基因的轉化子.酶活性分析錶明所得轉化子具有N-氨甲酰氨基痠水解酶活性,可將N-氨甲酰基苯丙氨痠水解為苯丙氨痠.
N-안갑선안기산수해매시을내선뇨매계적조성부분,최화N-안갑선안기산수해위상응안기산.절간균BT801적N-안갑선안기산수해매시해균을내선뇨매계중유일구입체전일성적매,야시정개반응체계적한속매.통과PCR종휴대을내선뇨매계완정조종자적아극륭질립pUC18-169상확증득도N-안갑선안기산수해매기인(hyu C)편단,련접도재체pPIC3.5K상,경BglⅡ매절선성화,통과PEG법전화도입필적효모GS115감수태세포,이용G418항성사선득도삽입다고패목적기인적전화자.매활성분석표명소득전화자구유N-안갑선안기산수해매활성,가장N-안갑선기분병안산수해위분병안산.
