CAJ | 학술논문

目的:探索葛根素体外诱导大鼠骨髓间充质细胞(Bone Marrow Stromal Cells MSCs)分化为神经元和胶质细胞的可行性,为中药在细胞定向分化中的应用提供理论和实验依据.方法:用贴壁法分离纯化SD大鼠骨髓间充质细胞.培养传至第5代,诱导组以2.5mg/ml的葛根素预诱导24h后,用17.5mg/ml的葛根素无血清培养基诱导,未诱导组加入等量培养基,24 h后相差显微镜观察形态变化,免疫细胞化学染色鉴定诱导后的细胞神经元特异性稀醇化酶(neuronspecific enolase NSE),神经胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein GFAP)蛋白的表达情况,MTT检测不同浓度葛根素诱导后细胞的活力,流式细胞仪及RT-PCR检测诱导前后细胞中NSE、GFAP的表达情况.结果:诱导18h后BMSCs胞体收缩,有突起伸出,24 h后突起增多呈网状.免疫细胞化学染色,NSE阳性表达率为(53.3±4.3)%,GFAP阳性表达为(64.5±5.2)%,流式细胞仪检测诱导24 h后的细胞NSE及GFAP表达量均较未诱导组升高,RT-PCR检测诱导后细胞表达NSE、GFAP,未诱导的细胞则不表达.结论:葛根素可诱导大鼠骨髓间充质细胞在体外分化为神经元和神经胶质细胞.
목적:탐색갈근소체외유도대서골수간충질세포(Bone Marrow Stromal Cells MSCs)분화위신경원화효질세포적가행성,위중약재세포정향분화중적응용제공이론화실험의거.방법:용첩벽법분리순화SD대서골수간충질세포.배양전지제5대,유도조이2.5mg/ml적갈근소예유도24h후,용17.5mg/ml적갈근소무혈청배양기유도,미유도조가입등량배양기,24 h후상차현미경관찰형태변화,면역세포화학염색감정유도후적세포신경원특이성희순화매(neuronspecific enolase NSE),신경효질섬유산성단백(glial fibrillary acidic protein GFAP)단백적표체정황,MTT검측불동농도갈근소유도후세포적활력,류식세포의급RT-PCR검측유도전후세포중NSE、GFAP적표체정황.결과:유도18h후BMSCs포체수축,유돌기신출,24 h후돌기증다정망상.면역세포화학염색,NSE양성표체솔위(53.3±4.3)%,GFAP양성표체위(64.5±5.2)%,류식세포의검측유도24 h후적세포NSE급GFAP표체량균교미유도조승고,RT-PCR검측유도후세포표체NSE、GFAP,미유도적세포칙불표체.결론:갈근소가유도대서골수간충질세포재체외분화위신경원화신경효질세포.