中华临床免疫和变态反应杂志
中華臨床免疫和變態反應雜誌
중화림상면역화변태반응잡지
CHINESE JOURNAL OF ALLERGY & CLINICAL IMMUNOLOGY
2008年
3期
173-178
,共6页
郑文洁%许江南%阳洪波%赵岩%唐福林
鄭文潔%許江南%暘洪波%趙巖%唐福林
정문길%허강남%양홍파%조암%당복림
内皮细胞%抗内皮细胞抗体%α-烯醇化酶%细胞凋亡
內皮細胞%抗內皮細胞抗體%α-烯醇化酶%細胞凋亡
내피세포%항내피세포항체%α-희순화매%세포조망
目的 探讨抗内皮细胞抗体(antiendothelial cell antibody,AECA)对内皮细胞凋亡的影响及重组α-烯醇化酶对内皮细胞凋亡的阻断作用.方法 以EA.hy926细胞(内皮细胞永生细胞)提取物蛋白为抗原,采用免疫印迹法检测并筛选47 000-AECA阳性患者血清,用蛋白G亲和层析法纯化IgG,在体外诱导内皮细胞凋亡,观察重组α-烯醇化酶对凋亡的阻断作用.结果 含47 000-AECA IgG在体外可诱导内皮细胞凋亡,荧光染色可见明显的核形态变化及典型的凋亡小体:含47 000-AECA系统性红斑狼疮患者的IgG作用于EA.hy926细胞24、48和72小时后,凋亡率均明显高于相同剂量正常人IgG;作用EA.hy926细胞的凋亡率;而经重组α-烯醇化酶预处理后EA.hy926细胞凋亡率则明显降低.含47 000-AECA IgG作用于EA.hy926细胞8小时后,Annexin V+细胞数明显增加,并随IgG作用时间和浓度的增加而升高;而经重组α-烯醇化酶预处理的含47000-AECAIgG作用于EA.hy926细胞后,Annexin V+细胞有所减少.结论 AECA在体外可诱导内皮细胞凋亡,引起内皮细胞损伤;重组α-烯醇化酶可部分阻断47000-AECA体外诱导内皮细胞凋亡的作用,α-烯醇化酶是AECA识别的自身抗原之一.
目的 探討抗內皮細胞抗體(antiendothelial cell antibody,AECA)對內皮細胞凋亡的影響及重組α-烯醇化酶對內皮細胞凋亡的阻斷作用.方法 以EA.hy926細胞(內皮細胞永生細胞)提取物蛋白為抗原,採用免疫印跡法檢測併篩選47 000-AECA暘性患者血清,用蛋白G親和層析法純化IgG,在體外誘導內皮細胞凋亡,觀察重組α-烯醇化酶對凋亡的阻斷作用.結果 含47 000-AECA IgG在體外可誘導內皮細胞凋亡,熒光染色可見明顯的覈形態變化及典型的凋亡小體:含47 000-AECA繫統性紅斑狼瘡患者的IgG作用于EA.hy926細胞24、48和72小時後,凋亡率均明顯高于相同劑量正常人IgG;作用EA.hy926細胞的凋亡率;而經重組α-烯醇化酶預處理後EA.hy926細胞凋亡率則明顯降低.含47 000-AECA IgG作用于EA.hy926細胞8小時後,Annexin V+細胞數明顯增加,併隨IgG作用時間和濃度的增加而升高;而經重組α-烯醇化酶預處理的含47000-AECAIgG作用于EA.hy926細胞後,Annexin V+細胞有所減少.結論 AECA在體外可誘導內皮細胞凋亡,引起內皮細胞損傷;重組α-烯醇化酶可部分阻斷47000-AECA體外誘導內皮細胞凋亡的作用,α-烯醇化酶是AECA識彆的自身抗原之一.
목적 탐토항내피세포항체(antiendothelial cell antibody,AECA)대내피세포조망적영향급중조α-희순화매대내피세포조망적조단작용.방법 이EA.hy926세포(내피세포영생세포)제취물단백위항원,채용면역인적법검측병사선47 000-AECA양성환자혈청,용단백G친화층석법순화IgG,재체외유도내피세포조망,관찰중조α-희순화매대조망적조단작용.결과 함47 000-AECA IgG재체외가유도내피세포조망,형광염색가견명현적핵형태변화급전형적조망소체:함47 000-AECA계통성홍반랑창환자적IgG작용우EA.hy926세포24、48화72소시후,조망솔균명현고우상동제량정상인IgG;작용EA.hy926세포적조망솔;이경중조α-희순화매예처리후EA.hy926세포조망솔칙명현강저.함47 000-AECA IgG작용우EA.hy926세포8소시후,Annexin V+세포수명현증가,병수IgG작용시간화농도적증가이승고;이경중조α-희순화매예처리적함47000-AECAIgG작용우EA.hy926세포후,Annexin V+세포유소감소.결론 AECA재체외가유도내피세포조망,인기내피세포손상;중조α-희순화매가부분조단47000-AECA체외유도내피세포조망적작용,α-희순화매시AECA식별적자신항원지일.
