医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2011年
1期
61-64
,共4页
袁茵%汤荟%王若%范雄林
袁茵%湯薈%王若%範雄林
원인%탕회%왕약%범웅림
绿色荧光蛋白%耻垢分枝杆菌%结核病
綠色熒光蛋白%恥垢分枝桿菌%結覈病
록색형광단백%치구분지간균%결핵병
目的 建立可表达绿色荧光蛋白的耻垢分枝杆菌,便于对耻垢分枝杆菌进行直观检测和快速定量.方法 利用PCR技术从真核表达质粒pLVTH扩增获得绿色荧光蛋白的编码基因,克隆入大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭载体pMV261,建立重组质粒pMVGFP,并经酶切鉴定证实.利用电穿孔技术将pMVGFP转化入耻垢分枝杆菌,利用卡那霉素抗性筛选重组耻垢分枝杆菌克隆,扩大培养后直接涂片,荧光显微镜镜检.结果 重组质粒pMVGFP构建正确;将重组耻垢分枝杆菌在荧光显微镜下观察,证实绿色荧光蛋白在重组耻垢分枝杆菌中的表达.结论 自发释放荧光的重组耻垢分枝杆菌的成功建立,为研究结核病致病机制和快速筛选化学药物等奠定了基础.
目的 建立可錶達綠色熒光蛋白的恥垢分枝桿菌,便于對恥垢分枝桿菌進行直觀檢測和快速定量.方法 利用PCR技術從真覈錶達質粒pLVTH擴增穫得綠色熒光蛋白的編碼基因,剋隆入大腸埃希菌-分枝桿菌穿梭載體pMV261,建立重組質粒pMVGFP,併經酶切鑒定證實.利用電穿孔技術將pMVGFP轉化入恥垢分枝桿菌,利用卡那黴素抗性篩選重組恥垢分枝桿菌剋隆,擴大培養後直接塗片,熒光顯微鏡鏡檢.結果 重組質粒pMVGFP構建正確;將重組恥垢分枝桿菌在熒光顯微鏡下觀察,證實綠色熒光蛋白在重組恥垢分枝桿菌中的錶達.結論 自髮釋放熒光的重組恥垢分枝桿菌的成功建立,為研究結覈病緻病機製和快速篩選化學藥物等奠定瞭基礎.
목적 건립가표체록색형광단백적치구분지간균,편우대치구분지간균진행직관검측화쾌속정량.방법 이용PCR기술종진핵표체질립pLVTH확증획득록색형광단백적편마기인,극륭입대장애희균-분지간균천사재체pMV261,건립중조질립pMVGFP,병경매절감정증실.이용전천공기술장pMVGFP전화입치구분지간균,이용잡나매소항성사선중조치구분지간균극륭,확대배양후직접도편,형광현미경경검.결과 중조질립pMVGFP구건정학;장중조치구분지간균재형광현미경하관찰,증실록색형광단백재중조치구분지간균중적표체.결론 자발석방형광적중조치구분지간균적성공건립,위연구결핵병치병궤제화쾌속사선화학약물등전정료기출.
