中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
6期
1061-1064
,共4页
陈海洋%蔡春青%谢翠华%罗琼%孟晓静
陳海洋%蔡春青%謝翠華%囉瓊%孟曉靜
진해양%채춘청%사취화%라경%맹효정
嗜中性粒细胞%极性%侧足%N-甲酰-甲硫氨酰-亮氨酰苯丙氨酸%F-actin
嗜中性粒細胞%極性%側足%N-甲酰-甲硫氨酰-亮氨酰苯丙氨痠%F-actin
기중성립세포%겁성%측족%N-갑선-갑류안선-량안선분병안산%F-actin
背景:中性粒细胞极性是其趋化和产生防御功能的基础,而极性化过程中定向能力和侧足形成是重要的环节,目前相关研究的报道还很少.目的:观察均匀浓度、陡峭浓度梯度、平缓浓度梯度3种实验模式下细胞极性过程中片足的方向和侧足的形成情况,试图找出研究中性粒细胞极性的方法学模式.方法:①采用密度梯度离心法,成功急性分离人中性粒细胞.②均匀浓度、陡峭浓度梯度和平缓浓度梯度甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸对细胞进行趋化刺激.③倒置显微镜下观察细胞极性变化情况,判断细胞移动方向.④对细胞进行荧光双标,激光共聚焦显微镜下观察F-actin聚合情况.结果与结论:①均匀浓度下,中性粒细胞极性化方向和移动轨迹随机分布.②陡峭梯度浓度下,41%的细胞呈现电极向心性分布.③平缓梯度下,68%的细胞表现为沿着甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸浓度的分布,χ2检验提示平缓浓度梯度实验模式存在较好的定向性.④三者均有明显的侧足形成,以均匀浓度为高,这与定向性呈现为相反的结果.结果显示平缓浓度梯度实验模式在研究细胞定向机制方面相对较好,另一方面对细胞定向的干扰可能来源于细胞侧足的形成.
揹景:中性粒細胞極性是其趨化和產生防禦功能的基礎,而極性化過程中定嚮能力和側足形成是重要的環節,目前相關研究的報道還很少.目的:觀察均勻濃度、陡峭濃度梯度、平緩濃度梯度3種實驗模式下細胞極性過程中片足的方嚮和側足的形成情況,試圖找齣研究中性粒細胞極性的方法學模式.方法:①採用密度梯度離心法,成功急性分離人中性粒細胞.②均勻濃度、陡峭濃度梯度和平緩濃度梯度甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨痠對細胞進行趨化刺激.③倒置顯微鏡下觀察細胞極性變化情況,判斷細胞移動方嚮.④對細胞進行熒光雙標,激光共聚焦顯微鏡下觀察F-actin聚閤情況.結果與結論:①均勻濃度下,中性粒細胞極性化方嚮和移動軌跡隨機分佈.②陡峭梯度濃度下,41%的細胞呈現電極嚮心性分佈.③平緩梯度下,68%的細胞錶現為沿著甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨痠濃度的分佈,χ2檢驗提示平緩濃度梯度實驗模式存在較好的定嚮性.④三者均有明顯的側足形成,以均勻濃度為高,這與定嚮性呈現為相反的結果.結果顯示平緩濃度梯度實驗模式在研究細胞定嚮機製方麵相對較好,另一方麵對細胞定嚮的榦擾可能來源于細胞側足的形成.
배경:중성립세포겁성시기추화화산생방어공능적기출,이겁성화과정중정향능력화측족형성시중요적배절,목전상관연구적보도환흔소.목적:관찰균균농도、두초농도제도、평완농도제도3충실험모식하세포겁성과정중편족적방향화측족적형성정황,시도조출연구중성립세포겁성적방법학모식.방법:①채용밀도제도리심법,성공급성분리인중성립세포.②균균농도、두초농도제도화평완농도제도갑선갑류안선-량안선-분병안산대세포진행추화자격.③도치현미경하관찰세포겁성변화정황,판단세포이동방향.④대세포진행형광쌍표,격광공취초현미경하관찰F-actin취합정황.결과여결론:①균균농도하,중성립세포겁성화방향화이동궤적수궤분포.②두초제도농도하,41%적세포정현전겁향심성분포.③평완제도하,68%적세포표현위연착갑선갑류안선-량안선-분병안산농도적분포,χ2검험제시평완농도제도실험모식존재교호적정향성.④삼자균유명현적측족형성,이균균농도위고,저여정향성정현위상반적결과.결과현시평완농도제도실험모식재연구세포정향궤제방면상대교호,령일방면대세포정향적간우가능래원우세포측족적형성.
