中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
40期
7441-7445
,共5页
汤浩%项永生%秦玲莎%姜晓丹%徐如祥%陈镇洲
湯浩%項永生%秦玲莎%薑曉丹%徐如祥%陳鎮洲
탕호%항영생%진령사%강효단%서여상%진진주
增强型绿色荧光蛋白%人骨髓基质细胞%慢病毒%转染%体内移植
增彊型綠色熒光蛋白%人骨髓基質細胞%慢病毒%轉染%體內移植
증강형록색형광단백%인골수기질세포%만병독%전염%체내이식
背景:原代细胞的转染效率低下一直是制约其发展的主要因素之一,慢病毒转染以其独特的优势成为各种干细胞基因修饰良好的转染方法.目的:验证慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞的可行性.方法:将携带增强型绿色荧光蛋白基因的慢病毒在含血清或无血清条件下按不同的MOI值分别转染人骨髓基质细胞,长期观察荧光蛋白表达情况.将经修饰的细胞通过立体定向移植入大鼠纹状体内,观察移植细胞的存活及目的基因的表达情况.结果与结论:基因转染48 h后,可见人骨髓基质细胞成功表达绿色荧光蛋白,无血清条件下的转染效率高于含血清条件下的转染效率,转染成功的细胞在体外持续培养2个月以上未见明显的荧光消减.转染后的细胞可在大鼠纹状体存活并持续表达绿色荧光蛋白2个月以上.提示慢病毒是一种高效的转染人骨髓基质细胞的载体,慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白基因转染可以作为人骨髓基质细胞的示踪标志用于体内移植研究.
揹景:原代細胞的轉染效率低下一直是製約其髮展的主要因素之一,慢病毒轉染以其獨特的優勢成為各種榦細胞基因脩飾良好的轉染方法.目的:驗證慢病毒載體介導增彊型綠色熒光蛋白基因脩飾人骨髓基質細胞的可行性.方法:將攜帶增彊型綠色熒光蛋白基因的慢病毒在含血清或無血清條件下按不同的MOI值分彆轉染人骨髓基質細胞,長期觀察熒光蛋白錶達情況.將經脩飾的細胞通過立體定嚮移植入大鼠紋狀體內,觀察移植細胞的存活及目的基因的錶達情況.結果與結論:基因轉染48 h後,可見人骨髓基質細胞成功錶達綠色熒光蛋白,無血清條件下的轉染效率高于含血清條件下的轉染效率,轉染成功的細胞在體外持續培養2箇月以上未見明顯的熒光消減.轉染後的細胞可在大鼠紋狀體存活併持續錶達綠色熒光蛋白2箇月以上.提示慢病毒是一種高效的轉染人骨髓基質細胞的載體,慢病毒載體介導增彊型綠色熒光蛋白基因轉染可以作為人骨髓基質細胞的示蹤標誌用于體內移植研究.
배경:원대세포적전염효솔저하일직시제약기발전적주요인소지일,만병독전염이기독특적우세성위각충간세포기인수식량호적전염방법.목적:험증만병독재체개도증강형록색형광단백기인수식인골수기질세포적가행성.방법:장휴대증강형록색형광단백기인적만병독재함혈청혹무혈청조건하안불동적MOI치분별전염인골수기질세포,장기관찰형광단백표체정황.장경수식적세포통과입체정향이식입대서문상체내,관찰이식세포적존활급목적기인적표체정황.결과여결론:기인전염48 h후,가견인골수기질세포성공표체록색형광단백,무혈청조건하적전염효솔고우함혈청조건하적전염효솔,전염성공적세포재체외지속배양2개월이상미견명현적형광소감.전염후적세포가재대서문상체존활병지속표체록색형광단백2개월이상.제시만병독시일충고효적전염인골수기질세포적재체,만병독재체개도증강형록색형광단백기인전염가이작위인골수기질세포적시종표지용우체내이식연구.
