质谱学报
質譜學報
질보학보
2011年
5期
257-264,270
,共9页
王雪颖%张养军%王昕%佟巍%秦伟捷%毛心丽%钱小红
王雪穎%張養軍%王昕%佟巍%秦偉捷%毛心麗%錢小紅
왕설영%장양군%왕흔%동외%진위첩%모심려%전소홍
胍基化%微波辅助%肽%蛋白质定量
胍基化%微波輔助%肽%蛋白質定量
고기화%미파보조%태%단백질정량
胍基化修饰在蛋白质组学鉴定及定量研究中发挥着重要的作用,本研究建立了一种蛋白质质谱分析中微波辅助快速胍基化的新方法.采用标准肽段系统地优化了反应溶剂pH值、O-甲基异脲的浓度及微波加热时间,发现标准肽段在pH 12的氨水溶液中,O-甲基异脲的浓度为1.5 mol/L,微波高火加热1 min的胍基化效率为99％.将此方法应用于马心肌红蛋白和牛血清白蛋白胰蛋白酶酶切肽段,质谱检测结果表明,含赖氨酸肽段的平均胍基化效率(95％)大于文献报道的平均胍基化效率(85％).与传统水浴加热胍基化方法相比,微波辅助加热胍基化方法缩短了反应时间,提高了反应效率,降低了肽段N端副反应.
胍基化脩飾在蛋白質組學鑒定及定量研究中髮揮著重要的作用,本研究建立瞭一種蛋白質質譜分析中微波輔助快速胍基化的新方法.採用標準肽段繫統地優化瞭反應溶劑pH值、O-甲基異脲的濃度及微波加熱時間,髮現標準肽段在pH 12的氨水溶液中,O-甲基異脲的濃度為1.5 mol/L,微波高火加熱1 min的胍基化效率為99％.將此方法應用于馬心肌紅蛋白和牛血清白蛋白胰蛋白酶酶切肽段,質譜檢測結果錶明,含賴氨痠肽段的平均胍基化效率(95％)大于文獻報道的平均胍基化效率(85％).與傳統水浴加熱胍基化方法相比,微波輔助加熱胍基化方法縮短瞭反應時間,提高瞭反應效率,降低瞭肽段N耑副反應.
고기화수식재단백질조학감정급정량연구중발휘착중요적작용,본연구건립료일충단백질질보분석중미파보조쾌속고기화적신방법.채용표준태단계통지우화료반응용제pH치、O-갑기이뇨적농도급미파가열시간,발현표준태단재pH 12적안수용액중,O-갑기이뇨적농도위1.5 mol/L,미파고화가열1 min적고기화효솔위99％.장차방법응용우마심기홍단백화우혈청백단백이단백매매절태단,질보검측결과표명,함뢰안산태단적평균고기화효솔(95％)대우문헌보도적평균고기화효솔(85％).여전통수욕가열고기화방법상비,미파보조가열고기화방법축단료반응시간,제고료반응효솔,강저료태단N단부반응.
