CAJ | 학술논문

目的:构建携改良型HBVpre-S1基因表达载体.方法:以我国HBV流行株adr的DNA为模板,PCR法提取并扩增HBVpre-S1,用定点突变延伸法完成突变.将突变后的HBVpre-S1基因片段通过双酶切,转化到制备好的DH5a感受态细胞中,纯化、质粒测序后,用醋酸锂法转化酵母细胞AH109.表达产物进行SDS-PAGE电泳分析和Western免疫印迹检测.结果:成功扩增出HBV流行株adr的HBVpre-S1基因片段,成功完成HBVpre-S1基因的突变,重组质粒pGBKT7 -HBVpre-S1构建成功.Western免疫印迹分析,显示对照无表达,而转化了pGBKT7-HBVpr-S1的印迹分析可见明显目的基因蛋白条带且无杂带.结论:成功扩增出HBVpre-S1基因片段并构建出携改良型HBVpre-S1基因表达载体,并在酵母中融合表达成功.
목적:구건휴개량형HBVpre-S1기인표체재체.방법:이아국HBV류행주adr적DNA위모판,PCR법제취병확증HBVpre-S1,용정점돌변연신법완성돌변.장돌변후적HBVpre-S1기인편단통과쌍매절,전화도제비호적DH5a감수태세포중,순화、질립측서후,용작산리법전화효모세포AH109.표체산물진행SDS-PAGE전영분석화Western면역인적검측.결과:성공확증출HBV류행주adr적HBVpre-S1기인편단,성공완성HBVpre-S1기인적돌변,중조질립pGBKT7 -HBVpre-S1구건성공.Western면역인적분석,현시대조무표체,이전화료pGBKT7-HBVpr-S1적인적분석가견명현목적기인단백조대차무잡대.결론:성공확증출HBVpre-S1기인편단병구건출휴개량형HBVpre-S1기인표체재체,병재효모중융합표체성공.