CAJ | 학술논문

目的观察MDA-7/IL-24基因对不同p53状态人肝癌细胞HepG2、MHCC97L以及Hep3B和正常的肝细胞L02的选择性杀伤作用,为肝癌的基因治疗提供理论基础.方法将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7感染人正常肝细胞L02和不同p53状态的肝癌细胞HepG2、MHCC97L、Hep3B.通过逆转录聚合酶链反应方法观察MDA-7/IL-24基因的表达,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中MDA-7/IL-24蛋白的浓度,通过四甲基偶氮唑盐染色法及Hoechst染色观察MDA-7/IL-24对肝癌细胞的生长抑制和杀伤作用,Annexin-V和碘化丙啶双染后流式细胞仪检测细胞的凋亡,应用流式细胞仪检测细胞周期.结果复制缺陷型腺病毒能介导外源基因MDA-7/IL-24在肝癌细胞株HepG2,MHCC97L和Hep3B以及正常细胞L02中高效表达.细胞培养上清液中有MDA-7/IL-24蛋白表达.MDA-7/IL-24能明显抑制各种肝癌细胞的生长,Hoechst染色提示MDA-7/IL-24促进肝癌细胞的凋亡,流式细胞仪提示MDA-7能选择性杀伤肝癌细胞而对正常的肝细胞无影响,细胞周期分析提示MDA-7/IL-24阻滞肝癌细胞在G2/M期,同时对正常的肝细胞没有促凋亡作用和增殖阻滞作用.结论复制缺陷型重组腺病毒载体Ad.mda-7能介导MDA-7/IL-24基因在人肝癌细胞中高效表达,选择性地杀伤肝癌细胞HepG2、MHCC97L和Hep3B,促进细胞增殖阻滞及诱导肿瘤细胞凋亡而与肿瘤细胞的P53基因的状态无关,同时对正常的肝细胞L02无任何毒性作用.
목적 관찰MDA-7/IL-24기인대불동p53상태인간암세포HepG2、MHCC97L이급Hep3B화정상적간세포L02적선택성살상작용,위간암적기인치료제공이론기출.방법 장휴대인MDA-7/IL-24기인적선병독Ad.mda-7감염인정상간세포L02화불동p53상태적간암세포HepG2、MHCC97L、Hep3B.통과역전록취합매련반응방법관찰MDA-7/IL-24기인적표체,매련면역흡부법검측세포배양상청액중MDA-7/IL-24단백적농도,통과사갑기우담서염염색법급Hoechst염색관찰MDA-7/IL-24대간암세포적생장억제화살상작용,Annexin-V화전화병정쌍염후류식세포의검측세포적조망,응용류식세포의검측세포주기.결과 복제결함형선병독능개도외원기인MDA-7/IL-24재간암세포주HepG2,MHCC97L화Hep3B이급정상세포L02중고효표체.세포배양상청액중유MDA-7/IL-24단백표체.MDA-7/IL-24능명현억제각충간암세포적생장,Hoechst염색제시MDA-7/IL-24촉진간암세포적조망,류식세포의제시MDA-7능선택성살상간암세포이대정상적간세포무영향,세포주기분석제시MDA-7/IL-24조체간암세포재G2/M기,동시대정상적간세포몰유촉조망작용화증식조체작용.결론 복제결함형중조선병독재체Ad.mda-7능개도MDA-7/IL-24기인재인간암세포중고효표체,선택성지살상간암세포HepG2、MHCC97L화Hep3B,촉진세포증식조체급유도종류세포조망이여종류세포적P53기인적상태무관,동시대정상적간세포L02무임하독성작용.