中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2004年
11期
943-948
,共6页
李根丛%聂明明%杨甲梅%苏长青%孙立臣%钱炎珍%Jonathan Sham%方国恩%吴孟超%钱其军
李根叢%聶明明%楊甲梅%囌長青%孫立臣%錢炎珍%Jonathan Sham%方國恩%吳孟超%錢其軍
리근총%섭명명%양갑매%소장청%손립신%전염진%Jonathan Sham%방국은%오맹초%전기군
癌,肝细胞%抗逆转录病毒治疗,高效%基因,治疗%端粒酶%内皮抑素
癌,肝細胞%抗逆轉錄病毒治療,高效%基因,治療%耑粒酶%內皮抑素
암,간세포%항역전록병독치료,고효%기인,치료%단립매%내피억소
目的探讨一种新的基因-病毒治疗系统CNHK300-murine endostatin(简称CNHK300-mE)对肝癌的治疗作用.方法利用基因重组技术构建一种用人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子控制腺病毒E1A基因表达并携带内皮抑素基因的基因-病毒治疗系统;通过50%组织培养感染剂量(TCID50)方法和细胞活性检测法四氮唑盐比色试验(MTT法)观察CNHK300-mE在2种肝癌细胞株(HepGII及Hep3B)及1株正常的成纤维细胞株(MRC-5)中的病毒增殖能力和对细胞的杀灭能力;通过肝癌SMMC 7721细胞裸鼠皮下移植瘤模型观察该病毒对肝癌生长和对肿瘤血管生成的抑制作用;利用Western印迹法和酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测内皮抑素基因在体内和体外的表达.结果分别感染肝癌细胞株和正常细胞株96 h后病毒的增殖倍数相差3296倍,其达到半数杀伤量(ED50)时的感染复数(MOI)值相差25倍,差异有显著意义,且两者均明显优于ONYX-015;CNHK300-mE能明显抑制肝癌皮下移植瘤内血管的生成,对肿瘤生长的抑制作用与携带同一治疗基因的非增殖型腺病毒和不携带治疗基因的增殖型腺病毒ONYX-015相比均增强(P均<0.01);其所介导的内皮抑素基因在体内和体外的表达量均与携带该基因的非增殖型腺病毒载体相比均增高(P<0.05和P<0.005).结论 CNHK300-mE是一种能在端粒酶阳性的肝癌细胞株中特异性增殖并杀灭肿瘤细胞的基因-病毒治疗系统,它既具有肿瘤增殖病毒在肿瘤细胞内特异性增殖的能力,又具有高效表达抗癌基因的能力,对肝癌生长具有很强的抑制作用,是一种具备治疗肝癌潜力的新型基因-病毒治疗系统.
目的探討一種新的基因-病毒治療繫統CNHK300-murine endostatin(簡稱CNHK300-mE)對肝癌的治療作用.方法利用基因重組技術構建一種用人耑粒酶逆轉錄酶(hTERT)啟動子控製腺病毒E1A基因錶達併攜帶內皮抑素基因的基因-病毒治療繫統;通過50%組織培養感染劑量(TCID50)方法和細胞活性檢測法四氮唑鹽比色試驗(MTT法)觀察CNHK300-mE在2種肝癌細胞株(HepGII及Hep3B)及1株正常的成纖維細胞株(MRC-5)中的病毒增殖能力和對細胞的殺滅能力;通過肝癌SMMC 7721細胞裸鼠皮下移植瘤模型觀察該病毒對肝癌生長和對腫瘤血管生成的抑製作用;利用Western印跡法和酶聯免疫吸附實驗(ELISA)法檢測內皮抑素基因在體內和體外的錶達.結果分彆感染肝癌細胞株和正常細胞株96 h後病毒的增殖倍數相差3296倍,其達到半數殺傷量(ED50)時的感染複數(MOI)值相差25倍,差異有顯著意義,且兩者均明顯優于ONYX-015;CNHK300-mE能明顯抑製肝癌皮下移植瘤內血管的生成,對腫瘤生長的抑製作用與攜帶同一治療基因的非增殖型腺病毒和不攜帶治療基因的增殖型腺病毒ONYX-015相比均增彊(P均<0.01);其所介導的內皮抑素基因在體內和體外的錶達量均與攜帶該基因的非增殖型腺病毒載體相比均增高(P<0.05和P<0.005).結論 CNHK300-mE是一種能在耑粒酶暘性的肝癌細胞株中特異性增殖併殺滅腫瘤細胞的基因-病毒治療繫統,它既具有腫瘤增殖病毒在腫瘤細胞內特異性增殖的能力,又具有高效錶達抗癌基因的能力,對肝癌生長具有很彊的抑製作用,是一種具備治療肝癌潛力的新型基因-病毒治療繫統.
목적탐토일충신적기인-병독치료계통CNHK300-murine endostatin(간칭CNHK300-mE)대간암적치료작용.방법이용기인중조기술구건일충용인단립매역전록매(hTERT)계동자공제선병독E1A기인표체병휴대내피억소기인적기인-병독치료계통;통과50%조직배양감염제량(TCID50)방법화세포활성검측법사담서염비색시험(MTT법)관찰CNHK300-mE재2충간암세포주(HepGII급Hep3B)급1주정상적성섬유세포주(MRC-5)중적병독증식능력화대세포적살멸능력;통과간암SMMC 7721세포라서피하이식류모형관찰해병독대간암생장화대종류혈관생성적억제작용;이용Western인적법화매련면역흡부실험(ELISA)법검측내피억소기인재체내화체외적표체.결과분별감염간암세포주화정상세포주96 h후병독적증식배수상차3296배,기체도반수살상량(ED50)시적감염복수(MOI)치상차25배,차이유현저의의,차량자균명현우우ONYX-015;CNHK300-mE능명현억제간암피하이식류내혈관적생성,대종류생장적억제작용여휴대동일치료기인적비증식형선병독화불휴대치료기인적증식형선병독ONYX-015상비균증강(P균<0.01);기소개도적내피억소기인재체내화체외적표체량균여휴대해기인적비증식형선병독재체상비균증고(P<0.05화P<0.005).결론 CNHK300-mE시일충능재단립매양성적간암세포주중특이성증식병살멸종류세포적기인-병독치료계통,타기구유종류증식병독재종류세포내특이성증식적능력,우구유고효표체항암기인적능력,대간암생장구유흔강적억제작용,시일충구비치료간암잠력적신형기인-병독치료계통.
