科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2005年
14期
1470-1474
,共5页
代红久%徐国江%Thomas Jean-luc%王铸钢%蒋容静%费俭
代紅久%徐國江%Thomas Jean-luc%王鑄鋼%蔣容靜%費儉
대홍구%서국강%Thomas Jean-luc%왕주강%장용정%비검
家蚕%基因%转基因%piggyBac%绿色荧光蛋白
傢蠶%基因%轉基因%piggyBac%綠色熒光蛋白
가잠%기인%전기인%piggyBac%록색형광단백
piggyBac转座子元件被成功应用于家蚕转基因. EGFP荧光蛋白基因作为筛选标志, 受含有Pax-6结合位点的启动子控制, 并能在家蚕的眼部组织中特异性表达. 荧光筛选质粒和piggyBac转座子表达质粒被以混合物的形式显微注射到家蚕受精卵, 获得出生的G0代蛾子700个, 互相交配后, 利用EGFP荧光筛选获得111个独立的转基因系. 大部分转基因系在基因组上携有2个或多个插入拷贝, 并且在整个项目过程中转基因的表型稳定遗传6代以上. 对插入位点的序列鉴定发现, 其插入位点两侧具有特异性TTAA序列, 证实转基因的插入受到piggyBac转座子的调控. 高效稳定的家蚕转基因技术的建立为家蚕后基因组的研究和蚕业工业的发展提供了基础.
piggyBac轉座子元件被成功應用于傢蠶轉基因. EGFP熒光蛋白基因作為篩選標誌, 受含有Pax-6結閤位點的啟動子控製, 併能在傢蠶的眼部組織中特異性錶達. 熒光篩選質粒和piggyBac轉座子錶達質粒被以混閤物的形式顯微註射到傢蠶受精卵, 穫得齣生的G0代蛾子700箇, 互相交配後, 利用EGFP熒光篩選穫得111箇獨立的轉基因繫. 大部分轉基因繫在基因組上攜有2箇或多箇插入拷貝, 併且在整箇項目過程中轉基因的錶型穩定遺傳6代以上. 對插入位點的序列鑒定髮現, 其插入位點兩側具有特異性TTAA序列, 證實轉基因的插入受到piggyBac轉座子的調控. 高效穩定的傢蠶轉基因技術的建立為傢蠶後基因組的研究和蠶業工業的髮展提供瞭基礎.
piggyBac전좌자원건피성공응용우가잠전기인. EGFP형광단백기인작위사선표지, 수함유Pax-6결합위점적계동자공제, 병능재가잠적안부조직중특이성표체. 형광사선질립화piggyBac전좌자표체질립피이혼합물적형식현미주사도가잠수정란, 획득출생적G0대아자700개, 호상교배후, 이용EGFP형광사선획득111개독립적전기인계. 대부분전기인계재기인조상휴유2개혹다개삽입고패, 병차재정개항목과정중전기인적표형은정유전6대이상. 대삽입위점적서렬감정발현, 기삽입위점량측구유특이성TTAA서렬, 증실전기인적삽입수도piggyBac전좌자적조공. 고효은정적가잠전기인기술적건립위가잠후기인조적연구화잠업공업적발전제공료기출.
