江苏大学学报（医学版）
江囌大學學報（醫學版）
강소대학학보（의학판）
JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY (MEDICINE EDITION)
2007年
2期
145-149
,共5页
茅凌翔%朱超望%许化溪%黄新祥
茅凌翔%硃超望%許化溪%黃新祥
모릉상%주초망%허화계%황신상
伤寒沙门菌%phoP%基因缺陷变异%同源重组
傷寒沙門菌%phoP%基因缺陷變異%同源重組
상한사문균%phoP%기인결함변이%동원중조
目的:为深入研究伤寒沙门菌调节因子phoP的功能,制备伤寒沙门菌phoP基因缺陷变异株.方法:根据伤寒沙门菌phoP基因序列,设计PCR特异性引物,并在5′末端加接酶Bgl Ⅱ位点,PCR扩增phoP基因上、下游片段后,用Bgl Ⅱ消化,再定向连接成phoP基因的缺损性同源性核苷酸片段.将此片段胶回收后并导入自杀质粒pGMB151的BamH Ⅰ位点,将阳性质粒用电转化导入伤寒沙门菌野生株,进行同源重组.用PCR观察重组现象,将完全重组的菌株作为phoP基因的缺陷变异株,并通过相应的核苷酸序列分析加以确定.结果:PCR及序列分析证实,缺陷变异株的phoP基因缺失297个碱基.结论:成功构建伤寒沙门菌phoP基因缺陷变异株,为进一步研究其在伤寒沙门菌中的功能奠定了基础.
目的:為深入研究傷寒沙門菌調節因子phoP的功能,製備傷寒沙門菌phoP基因缺陷變異株.方法:根據傷寒沙門菌phoP基因序列,設計PCR特異性引物,併在5′末耑加接酶Bgl Ⅱ位點,PCR擴增phoP基因上、下遊片段後,用Bgl Ⅱ消化,再定嚮連接成phoP基因的缺損性同源性覈苷痠片段.將此片段膠迴收後併導入自殺質粒pGMB151的BamH Ⅰ位點,將暘性質粒用電轉化導入傷寒沙門菌野生株,進行同源重組.用PCR觀察重組現象,將完全重組的菌株作為phoP基因的缺陷變異株,併通過相應的覈苷痠序列分析加以確定.結果:PCR及序列分析證實,缺陷變異株的phoP基因缺失297箇堿基.結論:成功構建傷寒沙門菌phoP基因缺陷變異株,為進一步研究其在傷寒沙門菌中的功能奠定瞭基礎.
목적:위심입연구상한사문균조절인자phoP적공능,제비상한사문균phoP기인결함변이주.방법:근거상한사문균phoP기인서렬,설계PCR특이성인물,병재5′말단가접매Bgl Ⅱ위점,PCR확증phoP기인상、하유편단후,용Bgl Ⅱ소화,재정향련접성phoP기인적결손성동원성핵감산편단.장차편단효회수후병도입자살질립pGMB151적BamH Ⅰ위점,장양성질립용전전화도입상한사문균야생주,진행동원중조.용PCR관찰중조현상,장완전중조적균주작위phoP기인적결함변이주,병통과상응적핵감산서렬분석가이학정.결과:PCR급서렬분석증실,결함변이주적phoP기인결실297개감기.결론:성공구건상한사문균phoP기인결함변이주,위진일보연구기재상한사문균중적공능전정료기출.
