CAJ | 학술논문

背景:大鼠脑缺血后植入脂肪源性神经干细胞可一定程度上恢复神经功能,但具体机制尚不清楚.目的:探讨人脂肪组织来源的神经干细胞移植后,对缺血性脑损伤人鼠血管新生和血管内皮生长因子表达的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-12/2008-07d在华北煤炭医学院中心实验室及形态实验室完成.材料:脂肪组织来源于北京通州区第二医院收治的去除腹部多余脂肪的健康女性.健康雄性SD大鼠50只,随机分为正常对照组5只、假手术组5只、模型对照组20只、细胞移植组20只.方法:无菌条件下分离培养人脂肪组织来源的基质细胞,胰酶消化后取第5代细胞向神经干细胞诱导分化,移植前行BrdU标记,细胞浓度调整为4×109L-1.模型对照组、细胞移植组大鼠采用线栓法复制局灶性脑缺血2 h冉灌注模型,造模1 d后细胞移植组经尾静脉注入0.5 mL人脂肪组织来源的神经干细胞悬液,模型对照组同法注入等量生理盐水.主要观察指标:免疫组织化学染色检测缺血区脑组织微血管密度,利用原位杂交技术观察缺血区脑组织血管内皮生长因子mRNA表达的动态变化.结果:缺血再灌注1周时缺血区皮质即可见大量的微血管增生,2周时微血管密度达高峰.第4,12周时有所下降,但缺血再灌注后各时间点细胞移植组缺血区脑组织微血管密度均显著高于模型对照组(t=4.859,P＜0.05).脑缺血再灌注1,2周时,缺血区脑组织中可见大量的血管内皮生长因子mRNA阳性细胞,阳性信号主要分布于皮质及血管周围的神经细胞;第4,12周时模型对照组血管内皮生长因子mRNA阳性信号减弱,而细胞移植组阳性信号仍呈较强表达(t=5.894,P＜0.01).结论:人脂肪组织来源的神经干细胞可能通过促进微血管增生、提高血管内皮生长因子mRNA表达来加快缺血区血运修复,从向改善脑缺血人鼠的神经功能. 揹景:大鼠腦缺血後植入脂肪源性神經榦細胞可一定程度上恢複神經功能,但具體機製尚不清楚.目的:探討人脂肪組織來源的神經榦細胞移植後,對缺血性腦損傷人鼠血管新生和血管內皮生長因子錶達的影響.設計、時間及地點:隨機對照動物實驗,于2007-12/2008-07d在華北煤炭醫學院中心實驗室及形態實驗室完成.材料:脂肪組織來源于北京通州區第二醫院收治的去除腹部多餘脂肪的健康女性.健康雄性SD大鼠50隻,隨機分為正常對照組5隻、假手術組5隻、模型對照組20隻、細胞移植組20隻.方法:無菌條件下分離培養人脂肪組織來源的基質細胞,胰酶消化後取第5代細胞嚮神經榦細胞誘導分化,移植前行BrdU標記,細胞濃度調整為4×109L-1.模型對照組、細胞移植組大鼠採用線栓法複製跼竈性腦缺血2 h冉灌註模型,造模1 d後細胞移植組經尾靜脈註入0.5 mL人脂肪組織來源的神經榦細胞懸液,模型對照組同法註入等量生理鹽水.主要觀察指標:免疫組織化學染色檢測缺血區腦組織微血管密度,利用原位雜交技術觀察缺血區腦組織血管內皮生長因子mRNA錶達的動態變化.結果:缺血再灌註1週時缺血區皮質即可見大量的微血管增生,2週時微血管密度達高峰.第4,12週時有所下降,但缺血再灌註後各時間點細胞移植組缺血區腦組織微血管密度均顯著高于模型對照組(t=4.859,P＜0.05).腦缺血再灌註1,2週時,缺血區腦組織中可見大量的血管內皮生長因子mRNA暘性細胞,暘性信號主要分佈于皮質及血管週圍的神經細胞;第4,12週時模型對照組血管內皮生長因子mRNA暘性信號減弱,而細胞移植組暘性信號仍呈較彊錶達(t=5.894,P＜0.01).結論:人脂肪組織來源的神經榦細胞可能通過促進微血管增生、提高血管內皮生長因子mRNA錶達來加快缺血區血運脩複,從嚮改善腦缺血人鼠的神經功能.
배경:대서뇌결혈후식입지방원성신경간세포가일정정도상회복신경공능,단구체궤제상불청초.목적:탐토인지방조직래원적신경간세포이식후,대결혈성뇌손상인서혈관신생화혈관내피생장인자표체적영향.설계、시간급지점:수궤대조동물실험,우2007-12/2008-07d재화북매탄의학원중심실험실급형태실험실완성.재료:지방조직래원우북경통주구제이의원수치적거제복부다여지방적건강녀성.건강웅성SD대서50지,수궤분위정상대조조5지、가수술조5지、모형대조조20지、세포이식조20지.방법:무균조건하분리배양인지방조직래원적기질세포,이매소화후취제5대세포향신경간세포유도분화,이식전행BrdU표기,세포농도조정위4×109L-1.모형대조조、세포이식조대서채용선전법복제국조성뇌결혈2 h염관주모형,조모1 d후세포이식조경미정맥주입0.5 mL인지방조직래원적신경간세포현액,모형대조조동법주입등량생리염수.주요관찰지표:면역조직화학염색검측결혈구뇌조직미혈관밀도,이용원위잡교기술관찰결혈구뇌조직혈관내피생장인자mRNA표체적동태변화.결과:결혈재관주1주시결혈구피질즉가견대량적미혈관증생,2주시미혈관밀도체고봉.제4,12주시유소하강,단결혈재관주후각시간점세포이식조결혈구뇌조직미혈관밀도균현저고우모형대조조(t=4.859,P＜0.05).뇌결혈재관주1,2주시,결혈구뇌조직중가견대량적혈관내피생장인자mRNA양성세포,양성신호주요분포우피질급혈관주위적신경세포;제4,12주시모형대조조혈관내피생장인자mRNA양성신호감약,이세포이식조양성신호잉정교강표체(t=5.894,P＜0.01).결론:인지방조직래원적신경간세포가능통과촉진미혈관증생、제고혈관내피생장인자mRNA표체래가쾌결혈구혈운수복,종향개선뇌결혈인서적신경공능.