南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2010年
4期
690-694,699
,共6页
李平%刘苹%陈星云%赵艳%宁亚蕾%杨楠%周元国
李平%劉蘋%陳星雲%趙豔%寧亞蕾%楊楠%週元國
리평%류평%진성운%조염%저아뢰%양남%주원국
Smad3基因%RNA干扰%TGF-β1%成纤维细胞%细胞增殖
Smad3基因%RNA榦擾%TGF-β1%成纖維細胞%細胞增殖
Smad3기인%RNA간우%TGF-β1%성섬유세포%세포증식
目的 构建大鼠Smad3基因特异性siRNA沉默质粒,并探讨其在TGF-β1双向调节成纤维细胞增殖中的作用.方法 构建大鼠Smad3基因沉默质粒,荧光纤维镜观察转染效率,定量PCR、免疫组化法检测Smad3基因和蛋白的变化,BrdU ELISA法和EMSA法分别检测转染siRNA及联合大小剂量TGF-β1刺激后细胞增殖和Smad3结合活性变化.结果 沉默质粒转染效率为41.2%,瞬时转染后具有促增殖作用且与转染剂量成正比,并使其mRNA表达下调50%、蛋白表达明显降低,还可降低大小剂量TGF-β1双向调节细胞增殖和Smad3结合活性的变化程度.结论 pSUPERSmad3沉默质粒构建成功,TGF-β1可通过调节Smad3来达到双向调节成纤维细胞增殖作用.
目的 構建大鼠Smad3基因特異性siRNA沉默質粒,併探討其在TGF-β1雙嚮調節成纖維細胞增殖中的作用.方法 構建大鼠Smad3基因沉默質粒,熒光纖維鏡觀察轉染效率,定量PCR、免疫組化法檢測Smad3基因和蛋白的變化,BrdU ELISA法和EMSA法分彆檢測轉染siRNA及聯閤大小劑量TGF-β1刺激後細胞增殖和Smad3結閤活性變化.結果 沉默質粒轉染效率為41.2%,瞬時轉染後具有促增殖作用且與轉染劑量成正比,併使其mRNA錶達下調50%、蛋白錶達明顯降低,還可降低大小劑量TGF-β1雙嚮調節細胞增殖和Smad3結閤活性的變化程度.結論 pSUPERSmad3沉默質粒構建成功,TGF-β1可通過調節Smad3來達到雙嚮調節成纖維細胞增殖作用.
목적 구건대서Smad3기인특이성siRNA침묵질립,병탐토기재TGF-β1쌍향조절성섬유세포증식중적작용.방법 구건대서Smad3기인침묵질립,형광섬유경관찰전염효솔,정량PCR、면역조화법검측Smad3기인화단백적변화,BrdU ELISA법화EMSA법분별검측전염siRNA급연합대소제량TGF-β1자격후세포증식화Smad3결합활성변화.결과 침묵질립전염효솔위41.2%,순시전염후구유촉증식작용차여전염제량성정비,병사기mRNA표체하조50%、단백표체명현강저,환가강저대소제량TGF-β1쌍향조절세포증식화Smad3결합활성적변화정도.결론 pSUPERSmad3침묵질립구건성공,TGF-β1가통과조절Smad3래체도쌍향조절성섬유세포증식작용.
