中国畜牧杂志
中國畜牧雜誌
중국축목잡지
CHINESE JOURNAL OF ANIMAL SCIENCE
2008年
17期
18-22
,共5页
曾有权%仇恒滨%徐凯%陆阳清%卢克焕
曾有權%仇恆濱%徐凱%陸暘清%盧剋煥
증유권%구항빈%서개%륙양청%로극환
猪精子%总RNA%RT-PCR%mRNA%电泳图
豬精子%總RNA%RT-PCR%mRNA%電泳圖
저정자%총RNA%RT-PCR%mRNA%전영도
实验采用Trizol一次法或试剂盒提取猪精子的总RNA,然后通过RT-PCR扩增的方法,检测精子和睾丸组织中鱼精蛋白(PRM-1)的mRNA;使用不同数量的精子,检测在本实验条件下能扩增出PRM-1带所需要的最小精子数量;通过OD260/280的测算,判断不同提取方法所得RNA的纯度;通过琼脂糖电泳得到精子RNA与睾丸、卵巢组织RNA的电泳图.实验结果表明:在使用KNA沉淀剂时,1.51×107精子可检测到PRM-1的mRNA,不使用沉淀剂则需要3.02×107精子才检测到;使用Trizol一次法提取的精子总RNA纯度较常规Mini试剂盒(W6221)高;本实验首次得到猪精子总RNA的普通琼脂糖凝胶电泳图.初步研究的结果表明,Trizol一次法可用来提取精子总RNA供进一步研究;猪精子RNA的28S和18S片段与睾丸、卵巢组织无明显差异.
實驗採用Trizol一次法或試劑盒提取豬精子的總RNA,然後通過RT-PCR擴增的方法,檢測精子和睪汍組織中魚精蛋白(PRM-1)的mRNA;使用不同數量的精子,檢測在本實驗條件下能擴增齣PRM-1帶所需要的最小精子數量;通過OD260/280的測算,判斷不同提取方法所得RNA的純度;通過瓊脂糖電泳得到精子RNA與睪汍、卵巢組織RNA的電泳圖.實驗結果錶明:在使用KNA沉澱劑時,1.51×107精子可檢測到PRM-1的mRNA,不使用沉澱劑則需要3.02×107精子纔檢測到;使用Trizol一次法提取的精子總RNA純度較常規Mini試劑盒(W6221)高;本實驗首次得到豬精子總RNA的普通瓊脂糖凝膠電泳圖.初步研究的結果錶明,Trizol一次法可用來提取精子總RNA供進一步研究;豬精子RNA的28S和18S片段與睪汍、卵巢組織無明顯差異.
실험채용Trizol일차법혹시제합제취저정자적총RNA,연후통과RT-PCR확증적방법,검측정자화고환조직중어정단백(PRM-1)적mRNA;사용불동수량적정자,검측재본실험조건하능확증출PRM-1대소수요적최소정자수량;통과OD260/280적측산,판단불동제취방법소득RNA적순도;통과경지당전영득도정자RNA여고환、란소조직RNA적전영도.실험결과표명:재사용KNA침정제시,1.51×107정자가검측도PRM-1적mRNA,불사용침정제칙수요3.02×107정자재검측도;사용Trizol일차법제취적정자총RNA순도교상규Mini시제합(W6221)고;본실험수차득도저정자총RNA적보통경지당응효전영도.초보연구적결과표명,Trizol일차법가용래제취정자총RNA공진일보연구;저정자RNA적28S화18S편단여고환、란소조직무명현차이.
