实用医学杂志
實用醫學雜誌
실용의학잡지
THE JOURNAL OF PRACTICAL MEDICINE
2010年
23期
4300-4302
,共3页
肺肿瘤%RNA干扰%PIN1基因%细胞增殖
肺腫瘤%RNA榦擾%PIN1基因%細胞增殖
폐종류%RNA간우%PIN1기인%세포증식
目的:研究应用RNA干扰技术在肺癌A549细胞沉默PIN1基因的表达对细胞增殖和细胞周期的影响.方法:构建靶向PIN1基因的shRNA真核表达载体,以脂质体转染A549细胞,G418抗生素筛选稳定沉默PIN1基因的细胞株,Real-time PCR和Western blot验证PIN1基因在mRNA和蛋白水平的抑制效率.PI染色流式细胞仪检测细胞增殖状况和细胞周期分布,分析PIN1下调对A549细胞增殖能力的影响.结果:成功构建了PIN1 shRNA真核表达载体,其表达量较阴性对照载体转染组最高下降了89.3%,蛋白表达显著抑制.流式细胞仪分析表明,PIN1抑制导致细胞出现G1期阻滞,增殖指数显著降低.结论:shRNA真核表达载体稳定转染A549能够有效沉默PIN1基因的表达,进而抑制肺癌细胞的增殖,影响细胞周期,改善肿瘤恶性表征.
目的:研究應用RNA榦擾技術在肺癌A549細胞沉默PIN1基因的錶達對細胞增殖和細胞週期的影響.方法:構建靶嚮PIN1基因的shRNA真覈錶達載體,以脂質體轉染A549細胞,G418抗生素篩選穩定沉默PIN1基因的細胞株,Real-time PCR和Western blot驗證PIN1基因在mRNA和蛋白水平的抑製效率.PI染色流式細胞儀檢測細胞增殖狀況和細胞週期分佈,分析PIN1下調對A549細胞增殖能力的影響.結果:成功構建瞭PIN1 shRNA真覈錶達載體,其錶達量較陰性對照載體轉染組最高下降瞭89.3%,蛋白錶達顯著抑製.流式細胞儀分析錶明,PIN1抑製導緻細胞齣現G1期阻滯,增殖指數顯著降低.結論:shRNA真覈錶達載體穩定轉染A549能夠有效沉默PIN1基因的錶達,進而抑製肺癌細胞的增殖,影響細胞週期,改善腫瘤噁性錶徵.
목적:연구응용RNA간우기술재폐암A549세포침묵PIN1기인적표체대세포증식화세포주기적영향.방법:구건파향PIN1기인적shRNA진핵표체재체,이지질체전염A549세포,G418항생소사선은정침묵PIN1기인적세포주,Real-time PCR화Western blot험증PIN1기인재mRNA화단백수평적억제효솔.PI염색류식세포의검측세포증식상황화세포주기분포,분석PIN1하조대A549세포증식능력적영향.결과:성공구건료PIN1 shRNA진핵표체재체,기표체량교음성대조재체전염조최고하강료89.3%,단백표체현저억제.류식세포의분석표명,PIN1억제도치세포출현G1기조체,증식지수현저강저.결론:shRNA진핵표체재체은정전염A549능구유효침묵PIN1기인적표체,진이억제폐암세포적증식,영향세포주기,개선종류악성표정.
