动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2011年
4期
6-9
,共4页
陈胜锋%王丙云%高健潜%陈志胜%计慧琴%陈金顶
陳勝鋒%王丙雲%高健潛%陳誌勝%計慧琴%陳金頂
진성봉%왕병운%고건잠%진지성%계혜금%진금정
Mx蛋白%原核表达%抗病毒活性%鸡
Mx蛋白%原覈錶達%抗病毒活性%鷄
Mx단백%원핵표체%항병독활성%계
将鸡Mx基因克隆入pET一32a载体,筛选鉴定后将重组阳性质粒转化到大肠埃希菌株BL21进行诱导表达,表达产物用west,ern blot鉴定,并经镍亲和层析法纯化及透析复性,得到的蛋白用微量细胞病变抑制法检测其抗病毒活性.结果显示,构建的载体经PCR扩增得到长度为2 118 bp的特异片段,测序结果证实与鸡Mx基因同源性99.95%,western blot结果显示在78 ku处检测到特异性蛋白条带,微量细胞病变抑制试验结果显示,表达产物经8倍和256倍稀释后可分别保护50 %鸡胚成纤维细胞免受新城疫病毒(NDV)和水疱性口炎病毒(VSV)的感染.结果表明,成功表达了鸡Mx蛋白,且表达产物具有一定的抗DNV和VSV活性.
將鷄Mx基因剋隆入pET一32a載體,篩選鑒定後將重組暘性質粒轉化到大腸埃希菌株BL21進行誘導錶達,錶達產物用west,ern blot鑒定,併經鎳親和層析法純化及透析複性,得到的蛋白用微量細胞病變抑製法檢測其抗病毒活性.結果顯示,構建的載體經PCR擴增得到長度為2 118 bp的特異片段,測序結果證實與鷄Mx基因同源性99.95%,western blot結果顯示在78 ku處檢測到特異性蛋白條帶,微量細胞病變抑製試驗結果顯示,錶達產物經8倍和256倍稀釋後可分彆保護50 %鷄胚成纖維細胞免受新城疫病毒(NDV)和水皰性口炎病毒(VSV)的感染.結果錶明,成功錶達瞭鷄Mx蛋白,且錶達產物具有一定的抗DNV和VSV活性.
장계Mx기인극륭입pET일32a재체,사선감정후장중조양성질립전화도대장애희균주BL21진행유도표체,표체산물용west,ern blot감정,병경얼친화층석법순화급투석복성,득도적단백용미량세포병변억제법검측기항병독활성.결과현시,구건적재체경PCR확증득도장도위2 118 bp적특이편단,측서결과증실여계Mx기인동원성99.95%,western blot결과현시재78 ku처검측도특이성단백조대,미량세포병변억제시험결과현시,표체산물경8배화256배희석후가분별보호50 %계배성섬유세포면수신성역병독(NDV)화수포성구염병독(VSV)적감염.결과표명,성공표체료계Mx단백,차표체산물구유일정적항DNV화VSV활성.
