东北师大学报(自然科学版)
東北師大學報(自然科學版)
동북사대학보(자연과학판)
JOURNAL OF NORTHEAST NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2012年
1期
140-144
,共5页
张建华%施恒亮%翟艳华%俞华莉%曹让娟%朱筱娟
張建華%施恆亮%翟豔華%俞華莉%曹讓娟%硃篠娟
장건화%시항량%적염화%유화리%조양연%주소연
肌球蛋白X%多克隆抗体%半抗原
肌毬蛋白X%多剋隆抗體%半抗原
기구단백X%다극륭항체%반항원
为制备兔抗肌球蛋白X (myosin X,Myo X)多克隆抗体,合成了含有Myo X N端1000~1021个氨基酸的多肽,将纯化后的多肽与钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)进行交联;通过背部皮下免疫新西兰大白兔获得免疫血清,并通过ELISA、免疫印迹、免疫荧光等分析对免疫血清进行了初步的验证.结果表明:经过4次免疫后可获得免疫血清,ELISA检测表明抗体终效价达到1∶51 200,抗原吸附实验进一步证明了此多克隆抗体的特异性.利用获得的多克隆抗体检测了多种组织中Myo X的表达,发现兔抗Myo X多克隆抗体可特异性识别多种组织中的Myo X.免疫荧光染色表明该抗体可以显示Myo X在COS-7细胞、NLT细胞和神经元中的分布.
為製備兔抗肌毬蛋白X (myosin X,Myo X)多剋隆抗體,閤成瞭含有Myo X N耑1000~1021箇氨基痠的多肽,將純化後的多肽與鑰孔慼血藍蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)進行交聯;通過揹部皮下免疫新西蘭大白兔穫得免疫血清,併通過ELISA、免疫印跡、免疫熒光等分析對免疫血清進行瞭初步的驗證.結果錶明:經過4次免疫後可穫得免疫血清,ELISA檢測錶明抗體終效價達到1∶51 200,抗原吸附實驗進一步證明瞭此多剋隆抗體的特異性.利用穫得的多剋隆抗體檢測瞭多種組織中Myo X的錶達,髮現兔抗Myo X多剋隆抗體可特異性識彆多種組織中的Myo X.免疫熒光染色錶明該抗體可以顯示Myo X在COS-7細胞、NLT細胞和神經元中的分佈.
위제비토항기구단백X (myosin X,Myo X)다극륭항체,합성료함유Myo X N단1000~1021개안기산적다태,장순화후적다태여약공척혈람단백(keyhole limpet hemocyanin,KLH)진행교련;통과배부피하면역신서란대백토획득면역혈청,병통과ELISA、면역인적、면역형광등분석대면역혈청진행료초보적험증.결과표명:경과4차면역후가획득면역혈청,ELISA검측표명항체종효개체도1∶51 200,항원흡부실험진일보증명료차다극륭항체적특이성.이용획득적다극륭항체검측료다충조직중Myo X적표체,발현토항Myo X다극륭항체가특이성식별다충조직중적Myo X.면역형광염색표명해항체가이현시Myo X재COS-7세포、NLT세포화신경원중적분포.