生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2012年
2期
120-124
,共5页
张艳霞%贾海英%司志飞%刘昊英%孟凡荣
張豔霞%賈海英%司誌飛%劉昊英%孟凡榮
장염하%가해영%사지비%류호영%맹범영
水稻%甲基结合蛋白%基因克隆%原核表达
水稻%甲基結閤蛋白%基因剋隆%原覈錶達
수도%갑기결합단백%기인극륭%원핵표체
甲基结合域蛋白MBD作为与甲基化位点特异结合的重要反式作用因子,在植物生长发育中发挥着重要的调控作用.为了探讨MBD基因的结构与功能,利用RT-PCR方法克隆了水稻中编码甲基结合蛋白基因MBD701,构建了MBD701的原核表达载体pGEX-MBD701,并在大肠杆菌BL21(DE3)工程菌株中实现了融合蛋白GST-MBD701的表达.结果表明,MBD701除了包含典型的甲基结合域(第138～212)外,还包含CW的锌指结构(第73～132)；在37℃,1 mmol/L IPTG浓度条件下成功诱导表达了大小为65.87 kD的GST-MBD701融合蛋白,这为进一步开展MBD701的蛋白纯化和功能分析奠定了基础.
甲基結閤域蛋白MBD作為與甲基化位點特異結閤的重要反式作用因子,在植物生長髮育中髮揮著重要的調控作用.為瞭探討MBD基因的結構與功能,利用RT-PCR方法剋隆瞭水稻中編碼甲基結閤蛋白基因MBD701,構建瞭MBD701的原覈錶達載體pGEX-MBD701,併在大腸桿菌BL21(DE3)工程菌株中實現瞭融閤蛋白GST-MBD701的錶達.結果錶明,MBD701除瞭包含典型的甲基結閤域(第138～212)外,還包含CW的鋅指結構(第73～132)；在37℃,1 mmol/L IPTG濃度條件下成功誘導錶達瞭大小為65.87 kD的GST-MBD701融閤蛋白,這為進一步開展MBD701的蛋白純化和功能分析奠定瞭基礎.
갑기결합역단백MBD작위여갑기화위점특이결합적중요반식작용인자,재식물생장발육중발휘착중요적조공작용.위료탐토MBD기인적결구여공능,이용RT-PCR방법극륭료수도중편마갑기결합단백기인MBD701,구건료MBD701적원핵표체재체pGEX-MBD701,병재대장간균BL21(DE3)공정균주중실현료융합단백GST-MBD701적표체.결과표명,MBD701제료포함전형적갑기결합역(제138～212)외,환포함CW적자지결구(제73～132)；재37℃,1 mmol/L IPTG농도조건하성공유도표체료대소위65.87 kD적GST-MBD701융합단백,저위진일보개전MBD701적단백순화화공능분석전정료기출.
