中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2011年
12期
1991-1994
,共4页
廖艳%袁晟光%廖维甲%覃理灵%梅铭惠%陈谦
廖豔%袁晟光%廖維甲%覃理靈%梅銘惠%陳謙
료염%원성광%료유갑%담리령%매명혜%진겸
RNA干扰%生存素%BEL-7404细胞%基因表达
RNA榦擾%生存素%BEL-7404細胞%基因錶達
RNA간우%생존소%BEL-7404세포%기인표체
目的 为研究生存素survivin基因的功能及肝细胞癌(HCC)的基因治疗策略.构建针对survivin基因的siRNA的表达载体,转染肝癌细胞系BEL-7404后评价其对survivin 基因表达的抑制作用.方法 依据survivin基因设计siRNA片断,构建pGenesil-1/survivin表达载体,脂质体LipofectamineTM 2000转染BEL-7404细胞.实时定量聚合酶链反应从基因转录水平检测survivin基因的表达率,应用免疫组织化学的方法检测肝癌细胞系BEL-7404中survivin蛋白表达抑制情况.结果 本实验已成功构建了针对survivin基因的pGenesil-1/survivin质粒.实时定量PCR检测显示,BEL-7404细胞经特异性siRNA作用后survivin基因的表达受抑制,其Ct值由34.2降低到22.8,免疫组织化学结果显示,pGenesil-1/survivin介导的siRNA能抑制BEL-7404细胞中survivin蛋白的表达.结论 构建的siRNA能特异地抑制survivin靶基因在肝癌细胞株BEL-7404中的表达,为肿瘤的生物学治疗提供了新的方法和材料.
目的 為研究生存素survivin基因的功能及肝細胞癌(HCC)的基因治療策略.構建針對survivin基因的siRNA的錶達載體,轉染肝癌細胞繫BEL-7404後評價其對survivin 基因錶達的抑製作用.方法 依據survivin基因設計siRNA片斷,構建pGenesil-1/survivin錶達載體,脂質體LipofectamineTM 2000轉染BEL-7404細胞.實時定量聚閤酶鏈反應從基因轉錄水平檢測survivin基因的錶達率,應用免疫組織化學的方法檢測肝癌細胞繫BEL-7404中survivin蛋白錶達抑製情況.結果 本實驗已成功構建瞭針對survivin基因的pGenesil-1/survivin質粒.實時定量PCR檢測顯示,BEL-7404細胞經特異性siRNA作用後survivin基因的錶達受抑製,其Ct值由34.2降低到22.8,免疫組織化學結果顯示,pGenesil-1/survivin介導的siRNA能抑製BEL-7404細胞中survivin蛋白的錶達.結論 構建的siRNA能特異地抑製survivin靶基因在肝癌細胞株BEL-7404中的錶達,為腫瘤的生物學治療提供瞭新的方法和材料.
목적 위연구생존소survivin기인적공능급간세포암(HCC)적기인치료책략.구건침대survivin기인적siRNA적표체재체,전염간암세포계BEL-7404후평개기대survivin 기인표체적억제작용.방법 의거survivin기인설계siRNA편단,구건pGenesil-1/survivin표체재체,지질체LipofectamineTM 2000전염BEL-7404세포.실시정량취합매련반응종기인전록수평검측survivin기인적표체솔,응용면역조직화학적방법검측간암세포계BEL-7404중survivin단백표체억제정황.결과 본실험이성공구건료침대survivin기인적pGenesil-1/survivin질립.실시정량PCR검측현시,BEL-7404세포경특이성siRNA작용후survivin기인적표체수억제,기Ct치유34.2강저도22.8,면역조직화학결과현시,pGenesil-1/survivin개도적siRNA능억제BEL-7404세포중survivin단백적표체.결론 구건적siRNA능특이지억제survivin파기인재간암세포주BEL-7404중적표체,위종류적생물학치료제공료신적방법화재료.
