中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2011年
8期
585-588,634
,共5页
张娜%张辉%胡圣伟%王安涛%张沾%陈创夫%乔军
張娜%張輝%鬍聖偉%王安濤%張霑%陳創伕%喬軍
장나%장휘%호골위%왕안도%장첨%진창부%교군
山羊痘病毒(GPV)%双向启动子%报告基因%P56b%Pb56%转录活性
山羊痘病毒(GPV)%雙嚮啟動子%報告基因%P56b%Pb56%轉錄活性
산양두병독(GPV)%쌍향계동자%보고기인%P56b%Pb56%전록활성
为鉴定山羊痘病毒(GPV)基因组中的启动子序列,本研究预测GPV基因组中早期转录因子VETF-1和中期转录因子VITF-3基因序列之间56 bp的一段序列为双向启动子,并将其命名为Pb56.通过PCR技术将该启动子序列的两个方向(Pb56+,Pb56-)分别与绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因融合,构建重组转移重组质粒,分别命名为pUC-TK12-Pb56(+)-EGFP和pUC-TK12-Pb56(-)-EGFP.用脂质体转染法将2个转移重组质粒以及阴性对照pUC-TK12-EGFP及阳性对照pUC-TK12-P7.5-EGFP分别转染GPV预感染的BHK细胞；采用EGFP报告基因的表达水平评估双向启动子的活性.结果表明该基因序列的两个方向均能启动EGFP的表达,初步证实了该基因序列为GPV的双向启动子；Pb56+和Pb56的转录活性均高于痘苗病毒的P7.5启动子.
為鑒定山羊痘病毒(GPV)基因組中的啟動子序列,本研究預測GPV基因組中早期轉錄因子VETF-1和中期轉錄因子VITF-3基因序列之間56 bp的一段序列為雙嚮啟動子,併將其命名為Pb56.通過PCR技術將該啟動子序列的兩箇方嚮(Pb56+,Pb56-)分彆與綠色熒光蛋白(EGFP)報告基因融閤,構建重組轉移重組質粒,分彆命名為pUC-TK12-Pb56(+)-EGFP和pUC-TK12-Pb56(-)-EGFP.用脂質體轉染法將2箇轉移重組質粒以及陰性對照pUC-TK12-EGFP及暘性對照pUC-TK12-P7.5-EGFP分彆轉染GPV預感染的BHK細胞；採用EGFP報告基因的錶達水平評估雙嚮啟動子的活性.結果錶明該基因序列的兩箇方嚮均能啟動EGFP的錶達,初步證實瞭該基因序列為GPV的雙嚮啟動子；Pb56+和Pb56的轉錄活性均高于痘苗病毒的P7.5啟動子.
위감정산양두병독(GPV)기인조중적계동자서렬,본연구예측GPV기인조중조기전록인자VETF-1화중기전록인자VITF-3기인서렬지간56 bp적일단서렬위쌍향계동자,병장기명명위Pb56.통과PCR기술장해계동자서렬적량개방향(Pb56+,Pb56-)분별여록색형광단백(EGFP)보고기인융합,구건중조전이중조질립,분별명명위pUC-TK12-Pb56(+)-EGFP화pUC-TK12-Pb56(-)-EGFP.용지질체전염법장2개전이중조질립이급음성대조pUC-TK12-EGFP급양성대조pUC-TK12-P7.5-EGFP분별전염GPV예감염적BHK세포；채용EGFP보고기인적표체수평평고쌍향계동자적활성.결과표명해기인서렬적량개방향균능계동EGFP적표체,초보증실료해기인서렬위GPV적쌍향계동자；Pb56+화Pb56적전록활성균고우두묘병독적P7.5계동자.
