CAJ | 학술논문

采用RT-PCR和cDNA末端快速扩增法(RACE)分离、克隆出鲇(Parasilurus asotus)垂体阿黑皮素原(proopiomelanocortin,POMC)基因全长cDNA序列,共1 099 bp,包括129 bp 5’非翻译区、648 bp阅读框以及322 bp3′非翻译区,阅读框共编码215个氨基酸,POMC前体蛋白的结构主要由信号肽(Met1-Ala28)、N端多肽(Gln29-Asp102)、促肾上腺皮质激素(ACTH,Ser105-Met144)、a-黑色素细胞刺激激素(a-MSH,Ser105-Val 117)、促肾上腺皮质激素样中叶肽(CLIP,Arg123-Met144)、γ-促脂解激素(γ-LPH,Glu145-Ser158)、β-黑色素细胞刺激激素(β-MSH,Asp161-Ser177)和β-内啡肽(β-EP,Tyr178-Leu215)构成.分子量计算值为24.66kD,理论等电点为7.25.同源性分析表明鲇与斑点叉尾(鲴)的相似性高达88％,其构成多肽中a-MSH、β-MSH、β-EP、CLIP保守性逐渐降低,而γ-MSH、连接肽(JP)、γ-LPH是变异比较大的区域,同时鲇POMC中不含有γ-MSH,连接肽和部分γ-LPH也不存在.生物信息学分析显示鲇POMC基因所编码的蛋白质以亲水性区域为主,具有丰富的B细胞抗原位点.定量分析结果表明POMC mRNA主要在垂体中高表达,在非垂体组织的脑中表达量最高,鳃、头肾、肝、脾、肌肉、皮肤等组织也有少量表达.
채용RT-PCR화cDNA말단쾌속확증법(RACE)분리、극륭출점(Parasilurus asotus)수체아흑피소원(proopiomelanocortin,POMC)기인전장cDNA서렬,공1 099 bp,포괄129 bp 5’비번역구、648 bp열독광이급322 bp3′비번역구,열독광공편마215개안기산,POMC전체단백적결구주요유신호태(Met1-Ala28)、N단다태(Gln29-Asp102)、촉신상선피질격소(ACTH,Ser105-Met144)、a-흑색소세포자격격소(a-MSH,Ser105-Val 117)、촉신상선피질격소양중협태(CLIP,Arg123-Met144)、γ-촉지해격소(γ-LPH,Glu145-Ser158)、β-흑색소세포자격격소(β-MSH,Asp161-Ser177)화β-내배태(β-EP,Tyr178-Leu215)구성.분자량계산치위24.66kD,이론등전점위7.25.동원성분석표명점여반점차미(고)적상사성고체88％,기구성다태중a-MSH、β-MSH、β-EP、CLIP보수성축점강저,이γ-MSH、련접태(JP)、γ-LPH시변이비교대적구역,동시점POMC중불함유γ-MSH,련접태화부분γ-LPH야불존재.생물신식학분석현시점POMC기인소편마적단백질이친수성구역위주,구유봉부적B세포항원위점.정량분석결과표명POMC mRNA주요재수체중고표체,재비수체조직적뇌중표체량최고,새、두신、간、비、기육、피부등조직야유소량표체.