农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2011年
4期
771-776
,共6页
张甜甜%牟海青%刘长霞%朱水芳%赵文军
張甜甜%牟海青%劉長霞%硃水芳%趙文軍
장첨첨%모해청%류장하%주수방%조문군
植原体%实时荧光PCR%巢式PCR%通用检测
植原體%實時熒光PCR%巢式PCR%通用檢測
식원체%실시형광PCR%소식PCR%통용검측
本实验意在研究一种能够应用于植原体初筛,并且不易污染,易操作耗时短的通用方法.比较了已报道TaqMan实时荧光PCR与目前最常用巢式PCR在植原体通用检测中的应用.利用12种植原体感染植株及9种健康植物DNA测试了实时荧光PCR的特异性及通用性.所有植原体材料均获得强的荧光信号,为阳性结果,而健康植物DNA及空白对照均为阴性结果.实验结果证明该实时荧光PCR应用于植原体通用检测具有良好的特异性,相对灵敏度比巢式PCR高10倍,耗时短,操作方便,有效避免了PCR产物污染.实时荧光PCR为植原体病害的口岸检疫、田间监测及大量样品的通用检测提供了良好的技术支撑,是一种可能代替目前最常用巢式PCR的方法.
本實驗意在研究一種能夠應用于植原體初篩,併且不易汙染,易操作耗時短的通用方法.比較瞭已報道TaqMan實時熒光PCR與目前最常用巢式PCR在植原體通用檢測中的應用.利用12種植原體感染植株及9種健康植物DNA測試瞭實時熒光PCR的特異性及通用性.所有植原體材料均穫得彊的熒光信號,為暘性結果,而健康植物DNA及空白對照均為陰性結果.實驗結果證明該實時熒光PCR應用于植原體通用檢測具有良好的特異性,相對靈敏度比巢式PCR高10倍,耗時短,操作方便,有效避免瞭PCR產物汙染.實時熒光PCR為植原體病害的口岸檢疫、田間鑑測及大量樣品的通用檢測提供瞭良好的技術支撐,是一種可能代替目前最常用巢式PCR的方法.
본실험의재연구일충능구응용우식원체초사,병차불역오염,역조작모시단적통용방법.비교료이보도TaqMan실시형광PCR여목전최상용소식PCR재식원체통용검측중적응용.이용12충식원체감염식주급9충건강식물DNA측시료실시형광PCR적특이성급통용성.소유식원체재료균획득강적형광신호,위양성결과,이건강식물DNA급공백대조균위음성결과.실험결과증명해실시형광PCR응용우식원체통용검측구유량호적특이성,상대령민도비소식PCR고10배,모시단,조작방편,유효피면료PCR산물오염.실시형광PCR위식원체병해적구안검역、전간감측급대량양품적통용검측제공료량호적기술지탱,시일충가능대체목전최상용소식PCR적방법.
