中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2010年
10期
92-96
,共5页
刘羿羿%赵丽霞%李燕%白俊%周欢敏
劉羿羿%趙麗霞%李燕%白俊%週歡敏
류예예%조려하%리연%백준%주환민
原始生殖细胞%Oct3/4%免疫荧光%Nanog
原始生殖細胞%Oct3/4%免疫熒光%Nanog
원시생식세포%Oct3/4%면역형광%Nanog
本试验从内蒙古白绒山羊胎儿的生殖嵴中分离出原始生殖细胞体外培养并进行了鉴定.为建立内蒙古绒山羊原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)的培养体系,试验对比了A、B、C 3组不同的培养条件对内蒙古绒山羊原始生殖细胞传代数的影响.RT-PCR鉴定结果表明,β-actin、hTERT、GAPDH、Nanog、Oct3/4为阳性、AKP染色为阳性;免疫荧光检测胚胎干细胞特异标志物Oct3/4、SSEA-3、SSEA-4呈阳性.未添加任何因子的A培养体系仅能传1代,添加LIF及Insulin的B培养体系可以传至4代,添加LIF、Insulin及优质胎牛血清的C组培养体系可以传至9代.
本試驗從內矇古白絨山羊胎兒的生殖嵴中分離齣原始生殖細胞體外培養併進行瞭鑒定.為建立內矇古絨山羊原始生殖細胞(primordial germ cells,PGCs)的培養體繫,試驗對比瞭A、B、C 3組不同的培養條件對內矇古絨山羊原始生殖細胞傳代數的影響.RT-PCR鑒定結果錶明,β-actin、hTERT、GAPDH、Nanog、Oct3/4為暘性、AKP染色為暘性;免疫熒光檢測胚胎榦細胞特異標誌物Oct3/4、SSEA-3、SSEA-4呈暘性.未添加任何因子的A培養體繫僅能傳1代,添加LIF及Insulin的B培養體繫可以傳至4代,添加LIF、Insulin及優質胎牛血清的C組培養體繫可以傳至9代.
본시험종내몽고백융산양태인적생식척중분리출원시생식세포체외배양병진행료감정.위건립내몽고융산양원시생식세포(primordial germ cells,PGCs)적배양체계,시험대비료A、B、C 3조불동적배양조건대내몽고융산양원시생식세포전대수적영향.RT-PCR감정결과표명,β-actin、hTERT、GAPDH、Nanog、Oct3/4위양성、AKP염색위양성;면역형광검측배태간세포특이표지물Oct3/4、SSEA-3、SSEA-4정양성.미첨가임하인자적A배양체계부능전1대,첨가LIF급Insulin적B배양체계가이전지4대,첨가LIF、Insulin급우질태우혈청적C조배양체계가이전지9대.