西南农业学报
西南農業學報
서남농업학보
SOUTHWEST CHINA JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
1期
266-269
,共4页
杨秀梅%瞿素萍%王丽花%崔光芬%彭绿春%王继华
楊秀梅%瞿素萍%王麗花%崔光芬%彭綠春%王繼華
양수매%구소평%왕려화%최광분%팽록춘%왕계화
百合%DNA提取%RGA-PCR
百閤%DNA提取%RGA-PCR
백합%DNA제취%RGA-PCR
以百合鳞片为材料,采用改良的CTAB法获得了高质量的基因组DNA.通过影响PCR反应各因子的优化,建立了适合百合的RGA-PCR反应体系:25μl体系中含30 ng模板DNA、2.5 mmol/L MgCl2、0.2 mmol/L d.NTPs、0.6 μmol/L引物及1.5 U Taq酶.扩增程序为:94 ℃预变性5 min,94℃变性1 min,44 ℃退火1 min,72 ℃延伸2 min,40个循环;最后72 ℃延伸7 min.利用该体系对35个百合品种进行RGA-PCR,表明该反应体系具有较好的稳定性和可靠性.
以百閤鱗片為材料,採用改良的CTAB法穫得瞭高質量的基因組DNA.通過影響PCR反應各因子的優化,建立瞭適閤百閤的RGA-PCR反應體繫:25μl體繫中含30 ng模闆DNA、2.5 mmol/L MgCl2、0.2 mmol/L d.NTPs、0.6 μmol/L引物及1.5 U Taq酶.擴增程序為:94 ℃預變性5 min,94℃變性1 min,44 ℃退火1 min,72 ℃延伸2 min,40箇循環;最後72 ℃延伸7 min.利用該體繫對35箇百閤品種進行RGA-PCR,錶明該反應體繫具有較好的穩定性和可靠性.
이백합린편위재료,채용개량적CTAB법획득료고질량적기인조DNA.통과영향PCR반응각인자적우화,건립료괄합백합적RGA-PCR반응체계:25μl체계중함30 ng모판DNA、2.5 mmol/L MgCl2、0.2 mmol/L d.NTPs、0.6 μmol/L인물급1.5 U Taq매.확증정서위:94 ℃예변성5 min,94℃변성1 min,44 ℃퇴화1 min,72 ℃연신2 min,40개순배;최후72 ℃연신7 min.이용해체계대35개백합품충진행RGA-PCR,표명해반응체계구유교호적은정성화가고성.
