细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2009年
10期
952-954
,共3页
栗竞%王汉斌%冯全洲%张晋%王红%王浩
慄競%王漢斌%馮全洲%張晉%王紅%王浩
률경%왕한빈%풍전주%장진%왕홍%왕호
Fas%心肌细胞%缺氧%凋亡
Fas%心肌細胞%缺氧%凋亡
Fas%심기세포%결양%조망
目的:利用体外培养心肌细胞缺氧模型,观察不同缺氧时间心肌细胞凋亡的发生及与Fas表达的关系.方法:原代培养乳鼠心肌细胞,随机分为对照组、缺氧1 h、2 h、3 h、4 h组,构建心肌细胞缺氧模型,应用膜联蛋白-Ⅴ与溴化丙啶双染法与Hoechst 33258染色法检测缺氧心肌细胞凋亡,应用免疫组化法检测Fas在心肌细胞上表达.应用West-ern blot检测Fas在心肌细胞表达.结果:膜联蛋白-Ⅴ与溴化丙啶双染法检测发现对照组、缺氧1 h、2 h、3 h和4 h组细胞凋亡率分别为(0.20±0.15)%,(4.32±0.56)%,(6.32±1.22)%,(8.32±1.19)%,(5.01±1.56)%(P<0.05);Hoechst 33258染色显示,与对照组比较,缺氧1 h、2 h、3 h和4 h组细胞的凋亡率明显升高;免疫组化与对照组比较,缺氧1 h、2 h、3 h、4 h组阳性细胞数明显升高(P<0.05),缺氧3 h组最高,缺氧4 h组略下降;Western blot检测结果提示对照组与4 h组Fas表达减弱,缺氧1 h、2 h和3 h组Fas表达上调.结论:缺氧可诱导心肌细胞的凋亡,缺氧时间延长引起凋亡率逐渐上升,至4 h时凋亡率开始下降,Fas表达量的变化趋势与凋亡率的变化趋势一致,Fas可能介导了缺氧诱导的心肌细胞凋亡.
目的:利用體外培養心肌細胞缺氧模型,觀察不同缺氧時間心肌細胞凋亡的髮生及與Fas錶達的關繫.方法:原代培養乳鼠心肌細胞,隨機分為對照組、缺氧1 h、2 h、3 h、4 h組,構建心肌細胞缺氧模型,應用膜聯蛋白-Ⅴ與溴化丙啶雙染法與Hoechst 33258染色法檢測缺氧心肌細胞凋亡,應用免疫組化法檢測Fas在心肌細胞上錶達.應用West-ern blot檢測Fas在心肌細胞錶達.結果:膜聯蛋白-Ⅴ與溴化丙啶雙染法檢測髮現對照組、缺氧1 h、2 h、3 h和4 h組細胞凋亡率分彆為(0.20±0.15)%,(4.32±0.56)%,(6.32±1.22)%,(8.32±1.19)%,(5.01±1.56)%(P<0.05);Hoechst 33258染色顯示,與對照組比較,缺氧1 h、2 h、3 h和4 h組細胞的凋亡率明顯升高;免疫組化與對照組比較,缺氧1 h、2 h、3 h、4 h組暘性細胞數明顯升高(P<0.05),缺氧3 h組最高,缺氧4 h組略下降;Western blot檢測結果提示對照組與4 h組Fas錶達減弱,缺氧1 h、2 h和3 h組Fas錶達上調.結論:缺氧可誘導心肌細胞的凋亡,缺氧時間延長引起凋亡率逐漸上升,至4 h時凋亡率開始下降,Fas錶達量的變化趨勢與凋亡率的變化趨勢一緻,Fas可能介導瞭缺氧誘導的心肌細胞凋亡.
목적:이용체외배양심기세포결양모형,관찰불동결양시간심기세포조망적발생급여Fas표체적관계.방법:원대배양유서심기세포,수궤분위대조조、결양1 h、2 h、3 h、4 h조,구건심기세포결양모형,응용막련단백-Ⅴ여추화병정쌍염법여Hoechst 33258염색법검측결양심기세포조망,응용면역조화법검측Fas재심기세포상표체.응용West-ern blot검측Fas재심기세포표체.결과:막련단백-Ⅴ여추화병정쌍염법검측발현대조조、결양1 h、2 h、3 h화4 h조세포조망솔분별위(0.20±0.15)%,(4.32±0.56)%,(6.32±1.22)%,(8.32±1.19)%,(5.01±1.56)%(P<0.05);Hoechst 33258염색현시,여대조조비교,결양1 h、2 h、3 h화4 h조세포적조망솔명현승고;면역조화여대조조비교,결양1 h、2 h、3 h、4 h조양성세포수명현승고(P<0.05),결양3 h조최고,결양4 h조략하강;Western blot검측결과제시대조조여4 h조Fas표체감약,결양1 h、2 h화3 h조Fas표체상조.결론:결양가유도심기세포적조망,결양시간연장인기조망솔축점상승,지4 h시조망솔개시하강,Fas표체량적변화추세여조망솔적변화추세일치,Fas가능개도료결양유도적심기세포조망.
