同济大学学报（医学版）
同濟大學學報（醫學版）
동제대학학보（의학판）
JOURNAL OF TONGJI UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCE)
2009年
6期
40-45
,共6页
殷冬梅%吴娟娟%井园%王新%葛锦涛
慇鼕梅%吳娟娟%井園%王新%葛錦濤
은동매%오연연%정완%왕신%갈금도
乳腺肿瘤细胞%反义寡核苷酸%葡萄糖神经酰胺合成酶%药物耐药
乳腺腫瘤細胞%反義寡覈苷痠%葡萄糖神經酰胺閤成酶%藥物耐藥
유선종류세포%반의과핵감산%포도당신경선알합성매%약물내약
目的 探讨靶向葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)的基因试剂MBO-asGCS逆转乳腺癌多药耐药的作用机制及其意义.方法 MBO-asGCS处理体外培养的人乳腺癌细胞MCF-7及其耐药型MCF-7/AdrR,采用细胞毒性分析测定MBO-asGCS对MCF-7-AdrR存活率的影响,RT-PCR和Western印迹分析对耐药型细胞GCS的表达变化,检测对caspase 3/7的活性影响及流式细胞仪测定MBO-asGCS对耐药型细胞的凋亡情况.结果 MBO-asGCS转染人耐药型乳腺癌细胞MCF-7/AdrR后,与未转染组细胞的IC50分别是0.18 μmol/L和12.50 μmol/L,药物敏感性提高了69倍;MBO-asGCS抑制GCS的mRNA表达70%,减少GCS蛋白表达39%(P<0.01);转染MBO-asGCS后耐药型细胞的caspase 3/7活性上升53%(P<0.05),细胞凋亡率上升5.6倍(P<0.01).结论 GCS过表达是耐药型乳腺癌细胞的特征,靶向人GCS的反义寡核苷酸可直接抑制GCS的过表达,诱导耐药细胞凋亡,有效逆转其耐药性,GCS可能是治疗耐药型乳腺癌的一个潜在靶点.
目的 探討靶嚮葡萄糖神經酰胺閤成酶(glucosylceramide synthase,GCS)的基因試劑MBO-asGCS逆轉乳腺癌多藥耐藥的作用機製及其意義.方法 MBO-asGCS處理體外培養的人乳腺癌細胞MCF-7及其耐藥型MCF-7/AdrR,採用細胞毒性分析測定MBO-asGCS對MCF-7-AdrR存活率的影響,RT-PCR和Western印跡分析對耐藥型細胞GCS的錶達變化,檢測對caspase 3/7的活性影響及流式細胞儀測定MBO-asGCS對耐藥型細胞的凋亡情況.結果 MBO-asGCS轉染人耐藥型乳腺癌細胞MCF-7/AdrR後,與未轉染組細胞的IC50分彆是0.18 μmol/L和12.50 μmol/L,藥物敏感性提高瞭69倍;MBO-asGCS抑製GCS的mRNA錶達70%,減少GCS蛋白錶達39%(P<0.01);轉染MBO-asGCS後耐藥型細胞的caspase 3/7活性上升53%(P<0.05),細胞凋亡率上升5.6倍(P<0.01).結論 GCS過錶達是耐藥型乳腺癌細胞的特徵,靶嚮人GCS的反義寡覈苷痠可直接抑製GCS的過錶達,誘導耐藥細胞凋亡,有效逆轉其耐藥性,GCS可能是治療耐藥型乳腺癌的一箇潛在靶點.
목적 탐토파향포도당신경선알합성매(glucosylceramide synthase,GCS)적기인시제MBO-asGCS역전유선암다약내약적작용궤제급기의의.방법 MBO-asGCS처리체외배양적인유선암세포MCF-7급기내약형MCF-7/AdrR,채용세포독성분석측정MBO-asGCS대MCF-7-AdrR존활솔적영향,RT-PCR화Western인적분석대내약형세포GCS적표체변화,검측대caspase 3/7적활성영향급류식세포의측정MBO-asGCS대내약형세포적조망정황.결과 MBO-asGCS전염인내약형유선암세포MCF-7/AdrR후,여미전염조세포적IC50분별시0.18 μmol/L화12.50 μmol/L,약물민감성제고료69배;MBO-asGCS억제GCS적mRNA표체70%,감소GCS단백표체39%(P<0.01);전염MBO-asGCS후내약형세포적caspase 3/7활성상승53%(P<0.05),세포조망솔상승5.6배(P<0.01).결론 GCS과표체시내약형유선암세포적특정,파향인GCS적반의과핵감산가직접억제GCS적과표체,유도내약세포조망,유효역전기내약성,GCS가능시치료내약형유선암적일개잠재파점.
