CAJ | 학술논문

背景:腹膜间皮细胞作为腹膜的重要组分,分泌多种细胞因子,在参与抗炎、免疫调节、腹膜纤维化等方面起着重要作用,如何获得优质、均一的腹膜间皮细胞成为解决这些问题的关键.目的:拟建立改良的人腹膜间皮细胞消化培养法.方法:0.1%胶原酶Ⅰ消化腹部大网膜组织,去除红细胞后用含体积分数为10%胎牛血清的1640 培养基培养.在培养过程中以倒置显微镜观察细胞形态变化,CCK-8 观察培养液对间皮细胞生长的促进作用,透射电子显微镜观察细胞超微结构,激光共聚焦免疫荧光鉴定细胞.结果与结论:分离培养的细胞为多角形,汇合时呈铺路石样排列,培养细胞的纯度达90%以上;生长良好,迅速,可传代至四五代.透射电子显微镜下见细胞表面大量的微绒毛,免疫荧光显示角蛋白、波形蛋白抗原阳性,白细胞CD45、第Ⅷ因子相关抗原阴性;所有被鉴定特征均符合间皮细胞的特点.结果提示胶原酶Ⅰ消化法是一种简单、高效、重复性高的分离腹膜间皮细胞的方法.
배경:복막간피세포작위복막적중요조분,분비다충세포인자,재삼여항염、면역조절、복막섬유화등방면기착중요작용,여하획득우질、균일적복막간피세포성위해결저사문제적관건.목적:의건립개량적인복막간피세포소화배양법.방법:0.1%효원매Ⅰ소화복부대망막조직,거제홍세포후용함체적분수위10%태우혈청적1640 배양기배양.재배양과정중이도치현미경관찰세포형태변화,CCK-8 관찰배양액대간피세포생장적촉진작용,투사전자현미경관찰세포초미결구,격광공취초면역형광감정세포.결과여결론:분리배양적세포위다각형,회합시정포로석양배렬,배양세포적순도체90%이상;생장량호,신속,가전대지사오대.투사전자현미경하견세포표면대량적미융모,면역형광현시각단백、파형단백항원양성,백세포CD45、제Ⅷ인자상관항원음성;소유피감정특정균부합간피세포적특점.결과제시효원매Ⅰ소화법시일충간단、고효、중복성고적분리복막간피세포적방법.