中华老年心脑血管病杂志
中華老年心腦血管病雜誌
중화노년심뇌혈관병잡지
CHINESE JOURNAL OF GERIATRIC CARDIOVASCULAR AND CEREBROVASCULAR DISEASES
2008年
12期
928-930
,共3页
牛建平%周志斌%史树海%彭瑞强
牛建平%週誌斌%史樹海%彭瑞彊
우건평%주지빈%사수해%팽서강
肌,平滑,血管%细胞培养技术%表型%免疫组织化学
肌,平滑,血管%細胞培養技術%錶型%免疫組織化學
기,평활,혈관%세포배양기술%표형%면역조직화학
目的 建立大鼠主动脉分化表型血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)原代培养,为研究VSMC表型转化的分子机制提供体外研究模型.方法 无菌条件下分离大鼠胸主动脉中膜,组织贴壁法在Ⅳ型胶原蛋白包被培养瓶内培养大鼠胸主动脉VSMC,消化、过滤、离心,收集从组织块分离的单个细胞后,接种于含0.2%小牛血清、胰岛素样生长因子Ⅰ、DMEM培养液的层粘连蛋白包被的培养板上,培养1天后将培养液更换为不合血清及生长因子的DMEM.结果 根据细胞形态观察、免疫组织化学鉴定、兴奋剂刺激引发的收缩反应、分化型VSMC标志基因的检测,证实为分化型VSMC,分化状态可持续1周以上.结论 在组织贴壁法基础上,改变培养环境,可使VSMC较长时间保持于分化状态,是研究VSMC表型转化的分子机制良好的体外研究模型.
目的 建立大鼠主動脈分化錶型血管平滑肌細胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)原代培養,為研究VSMC錶型轉化的分子機製提供體外研究模型.方法 無菌條件下分離大鼠胸主動脈中膜,組織貼壁法在Ⅳ型膠原蛋白包被培養瓶內培養大鼠胸主動脈VSMC,消化、過濾、離心,收集從組織塊分離的單箇細胞後,接種于含0.2%小牛血清、胰島素樣生長因子Ⅰ、DMEM培養液的層粘連蛋白包被的培養闆上,培養1天後將培養液更換為不閤血清及生長因子的DMEM.結果 根據細胞形態觀察、免疫組織化學鑒定、興奮劑刺激引髮的收縮反應、分化型VSMC標誌基因的檢測,證實為分化型VSMC,分化狀態可持續1週以上.結論 在組織貼壁法基礎上,改變培養環境,可使VSMC較長時間保持于分化狀態,是研究VSMC錶型轉化的分子機製良好的體外研究模型.
목적 건립대서주동맥분화표형혈관평활기세포(vascular smooth muscle cell,VSMC)원대배양,위연구VSMC표형전화적분자궤제제공체외연구모형.방법 무균조건하분리대서흉주동맥중막,조직첩벽법재Ⅳ형효원단백포피배양병내배양대서흉주동맥VSMC,소화、과려、리심,수집종조직괴분리적단개세포후,접충우함0.2%소우혈청、이도소양생장인자Ⅰ、DMEM배양액적층점련단백포피적배양판상,배양1천후장배양액경환위불합혈청급생장인자적DMEM.결과 근거세포형태관찰、면역조직화학감정、흥강제자격인발적수축반응、분화형VSMC표지기인적검측,증실위분화형VSMC,분화상태가지속1주이상.결론 재조직첩벽법기출상,개변배양배경,가사VSMC교장시간보지우분화상태,시연구VSMC표형전화적분자궤제량호적체외연구모형.
