热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2008年
10期
1024-1027
,共4页
庄鹏%李志莹%范紫香%江元森%姚集鲁
莊鵬%李誌瑩%範紫香%江元森%姚集魯
장붕%리지형%범자향%강원삼%요집로
肝细胞%细胞培养%分离%细胞功能
肝細胞%細胞培養%分離%細胞功能
간세포%세포배양%분리%세포공능
目的 建立经济有效且功能良好的原代肝细胞体外分离培养系统.方法 采用0.02%胶原酶和Pereoll分离液分离纯化大鼠肝细胞,光镜和电镜下观察HepatoZYME-SFM培养的肝细胞形态,自动生化仪定期检测培养肝细胞功能,RT-PCR半定量方法检测白蛋白mRNA,高效液相色谱法(high performance liquidchromatography,HPLC)分析安定代谢能力.结果 分离纯化的大鼠肝细胞总数(2-3)×108>cells/整肝,活力和纯度大于95%,生长良好形态正常.培养3 d后ALT、AST显著下降,加入NH4>C1后8 d内BUN保持相对稳定高水平,白蛋白合成在第3～4天达到高峰.培养的2～5 d内肝细胞可有效清除安定.结论 通过使用低浓度胶原酶灌流、Percoll分离液纯化以及HepatoZYME-SFM无血清培养基培养,肝细胞可有效保持良好形态结构和一定的生物合成代谢能力.
目的 建立經濟有效且功能良好的原代肝細胞體外分離培養繫統.方法 採用0.02%膠原酶和Pereoll分離液分離純化大鼠肝細胞,光鏡和電鏡下觀察HepatoZYME-SFM培養的肝細胞形態,自動生化儀定期檢測培養肝細胞功能,RT-PCR半定量方法檢測白蛋白mRNA,高效液相色譜法(high performance liquidchromatography,HPLC)分析安定代謝能力.結果 分離純化的大鼠肝細胞總數(2-3)×108>cells/整肝,活力和純度大于95%,生長良好形態正常.培養3 d後ALT、AST顯著下降,加入NH4>C1後8 d內BUN保持相對穩定高水平,白蛋白閤成在第3～4天達到高峰.培養的2～5 d內肝細胞可有效清除安定.結論 通過使用低濃度膠原酶灌流、Percoll分離液純化以及HepatoZYME-SFM無血清培養基培養,肝細胞可有效保持良好形態結構和一定的生物閤成代謝能力.
목적 건립경제유효차공능량호적원대간세포체외분리배양계통.방법 채용0.02%효원매화Pereoll분리액분리순화대서간세포,광경화전경하관찰HepatoZYME-SFM배양적간세포형태,자동생화의정기검측배양간세포공능,RT-PCR반정량방법검측백단백mRNA,고효액상색보법(high performance liquidchromatography,HPLC)분석안정대사능력.결과 분리순화적대서간세포총수(2-3)×108>cells/정간,활력화순도대우95%,생장량호형태정상.배양3 d후ALT、AST현저하강,가입NH4>C1후8 d내BUN보지상대은정고수평,백단백합성재제3～4천체도고봉.배양적2～5 d내간세포가유효청제안정.결론 통과사용저농도효원매관류、Percoll분리액순화이급HepatoZYME-SFM무혈청배양기배양,간세포가유효보지량호형태결구화일정적생물합성대사능력.
