CAJ | 학술논문

[目的]实现蚓激酶基因在大肠杆菌中的高效表达.[方法]采用RT-PCR技术,以含蚓激酶基因的质粒pMD18-Tf3为模板进行RT-PCR扩增,克隆了蚓激酶基因Tfc,并进行测序,之后将蚓激酶基因Tfc克隆到大肠杆菌表达载体pBV220,转化大肠杆菌DH5α,用LB培养基于30 ℃培养24 h后,然后调温至42 ℃继续培养2 h诱导蚓激酶基因表达,收集菌体,进行SDS-PAGE电泳,利用纤维平板法检验蚓激酶的活性.[结果]测序发现该基因全长729 bp,共编码243个氨基酸,GenBank登录号为EU167735.SDS-PAGE电泳表明诱导表达后菌体总蛋白在28 kD处有一特异性条带,而含空质粒pBV220的大肠杆菌经诱导表达后无该条带,表达蛋白主要以包涵体形式存在,无纤维蛋白酶活性.[结论]该研究为创新蚓激酶的生产工艺提供了依据.
[목적]실현인격매기인재대장간균중적고효표체.[방법]채용RT-PCR기술,이함인격매기인적질립pMD18-Tf3위모판진행RT-PCR확증,극륭료인격매기인Tfc,병진행측서,지후장인격매기인Tfc극륭도대장간균표체재체pBV220,전화대장간균DH5α,용LB배양기우30 ℃배양24 h후,연후조온지42 ℃계속배양2 h유도인격매기인표체,수집균체,진행SDS-PAGE전영,이용섬유평판법검험인격매적활성.[결과]측서발현해기인전장729 bp,공편마243개안기산,GenBank등록호위EU167735.SDS-PAGE전영표명유도표체후균체총단백재28 kD처유일특이성조대,이함공질립pBV220적대장간균경유도표체후무해조대,표체단백주요이포함체형식존재,무섬유단백매활성.[결론]해연구위창신인격매적생산공예제공료의거.