中国比较医学杂志
中國比較醫學雜誌
중국비교의학잡지
CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
2008年
10期
18-23,插4-,插5
,共8页
瞿秀华%阚广捍%余琛琳%汤球%孙伟%崔淑芳
瞿秀華%闞廣捍%餘琛琳%湯毬%孫偉%崔淑芳
구수화%감엄한%여침림%탕구%손위%최숙방
单核苷酸多态性%芯片%双色荧光杂交%小鼠
單覈苷痠多態性%芯片%雙色熒光雜交%小鼠
단핵감산다태성%심편%쌍색형광잡교%소서
目的 探讨采用单核苷酸多态性(SNP)检测方法-双色荧光正相杂交芯片技术对近交系小鼠遗传质量监测及相关影响因素.方法 运用基于芯片的双色荧光正相杂交检测SNP技术,进行芯片杂交动力学研究,考察信号值(Cy3,Cy5)和ratio值(Cy5/Cy3)与PCR产物点样浓度、PCB产物长度和荧光标记探针长度之间的关系,研究PCR产物点样浓度、PCR产物长度和荧光标记探针长度对SNP分型的影响.结果 采用正反标记实验后,Ratio值随着PCR产物点样浓度的增加呈稳定趋势;PCR双链产物长度对信号值影响比较大,点样时其长度不宜太长,最好不超过450 bp;随荧光标记探针长度的增加,基因分型能力明显下降,长度为15 bp最佳,长度超过20 bp时,已基本没有区分能力.结论 PCR产物点样浓度、PCR产物长度和荧光标记探针长度是双色荧光正相杂交SNP分型系统的重要影响因素,采取适当的PCR产物点样浓度、PCR产物长度和荧光标记探针长度,并采用正反标记实验,可以取得稳定、准确的基因分型效果.为进一步进行近交系小鼠遗传质量监测的研究奠定基础.
目的 探討採用單覈苷痠多態性(SNP)檢測方法-雙色熒光正相雜交芯片技術對近交繫小鼠遺傳質量鑑測及相關影響因素.方法 運用基于芯片的雙色熒光正相雜交檢測SNP技術,進行芯片雜交動力學研究,攷察信號值(Cy3,Cy5)和ratio值(Cy5/Cy3)與PCR產物點樣濃度、PCB產物長度和熒光標記探針長度之間的關繫,研究PCR產物點樣濃度、PCR產物長度和熒光標記探針長度對SNP分型的影響.結果 採用正反標記實驗後,Ratio值隨著PCR產物點樣濃度的增加呈穩定趨勢;PCR雙鏈產物長度對信號值影響比較大,點樣時其長度不宜太長,最好不超過450 bp;隨熒光標記探針長度的增加,基因分型能力明顯下降,長度為15 bp最佳,長度超過20 bp時,已基本沒有區分能力.結論 PCR產物點樣濃度、PCR產物長度和熒光標記探針長度是雙色熒光正相雜交SNP分型繫統的重要影響因素,採取適噹的PCR產物點樣濃度、PCR產物長度和熒光標記探針長度,併採用正反標記實驗,可以取得穩定、準確的基因分型效果.為進一步進行近交繫小鼠遺傳質量鑑測的研究奠定基礎.
목적 탐토채용단핵감산다태성(SNP)검측방법-쌍색형광정상잡교심편기술대근교계소서유전질량감측급상관영향인소.방법 운용기우심편적쌍색형광정상잡교검측SNP기술,진행심편잡교동역학연구,고찰신호치(Cy3,Cy5)화ratio치(Cy5/Cy3)여PCR산물점양농도、PCB산물장도화형광표기탐침장도지간적관계,연구PCR산물점양농도、PCR산물장도화형광표기탐침장도대SNP분형적영향.결과 채용정반표기실험후,Ratio치수착PCR산물점양농도적증가정은정추세;PCR쌍련산물장도대신호치영향비교대,점양시기장도불의태장,최호불초과450 bp;수형광표기탐침장도적증가,기인분형능력명현하강,장도위15 bp최가,장도초과20 bp시,이기본몰유구분능력.결론 PCR산물점양농도、PCR산물장도화형광표기탐침장도시쌍색형광정상잡교SNP분형계통적중요영향인소,채취괄당적PCR산물점양농도、PCR산물장도화형광표기탐침장도,병채용정반표기실험,가이취득은정、준학적기인분형효과.위진일보진행근교계소서유전질량감측적연구전정기출.
