苏州大学学报(医学版)
囌州大學學報(醫學版)
소주대학학보(의학판)
SUZHOU UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCE
2008年
4期
545-548
,共4页
宋妙丽%杨晓春%申咏梅%张梅花%孙亦晖%沈钧康
宋妙麗%楊曉春%申詠梅%張梅花%孫亦暉%瀋鈞康
송묘려%양효춘%신영매%장매화%손역휘%침균강
胰腺癌%K-ras基因%点突变%聚合酶链反应
胰腺癌%K-ras基因%點突變%聚閤酶鏈反應
이선암%K-ras기인%점돌변%취합매련반응
目的 检测人胰腺癌细胞株Patu 8988 K-ras基因点突变及其突变方式,明确基因治疗靶点的碱基序列.方法 针对K-ras基因第12位密码子点突变方式(CGT、GIT、GAT)设计顺序特异性引物(SSP),对人胰腺癌细胞株Patu 8988进行聚合酶链反应(PCR),扩增产物经12%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后判断该细胞株有无K-ras基因点突变及其突变方式.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增人胰腺癌细胞株Patu 8988 K-ras基因,扩增产物直接进行基因序列测定.结果 PCR-SSP法检测人胰腺癌细胞株Patu 8988存在K-ras基因点突变,突变方式为GGT→GTT,其结果 与基因序列测定完全相符.结论 明确了人胰腺癌细胞株Patu 8988 K-ras基因第12位密码子点突变方式(GGT→GTT),为胰腺癌的下一步基因治疗研究打下了坚实的基础;PCR-SSP方法 检测K-ras基因点突变简便、快速、经济且特异性高,有望在临床上成为早期诊断和鉴别诊断胰腺癌的实用检测方法.
目的 檢測人胰腺癌細胞株Patu 8988 K-ras基因點突變及其突變方式,明確基因治療靶點的堿基序列.方法 針對K-ras基因第12位密碼子點突變方式(CGT、GIT、GAT)設計順序特異性引物(SSP),對人胰腺癌細胞株Patu 8988進行聚閤酶鏈反應(PCR),擴增產物經12%非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳後判斷該細胞株有無K-ras基因點突變及其突變方式.逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)擴增人胰腺癌細胞株Patu 8988 K-ras基因,擴增產物直接進行基因序列測定.結果 PCR-SSP法檢測人胰腺癌細胞株Patu 8988存在K-ras基因點突變,突變方式為GGT→GTT,其結果 與基因序列測定完全相符.結論 明確瞭人胰腺癌細胞株Patu 8988 K-ras基因第12位密碼子點突變方式(GGT→GTT),為胰腺癌的下一步基因治療研究打下瞭堅實的基礎;PCR-SSP方法 檢測K-ras基因點突變簡便、快速、經濟且特異性高,有望在臨床上成為早期診斷和鑒彆診斷胰腺癌的實用檢測方法.
목적 검측인이선암세포주Patu 8988 K-ras기인점돌변급기돌변방식,명학기인치료파점적감기서렬.방법 침대K-ras기인제12위밀마자점돌변방식(CGT、GIT、GAT)설계순서특이성인물(SSP),대인이선암세포주Patu 8988진행취합매련반응(PCR),확증산물경12%비변성취병희선알응효전영후판단해세포주유무K-ras기인점돌변급기돌변방식.역전록-취합매련반응(RT-PCR)확증인이선암세포주Patu 8988 K-ras기인,확증산물직접진행기인서렬측정.결과 PCR-SSP법검측인이선암세포주Patu 8988존재K-ras기인점돌변,돌변방식위GGT→GTT,기결과 여기인서렬측정완전상부.결론 명학료인이선암세포주Patu 8988 K-ras기인제12위밀마자점돌변방식(GGT→GTT),위이선암적하일보기인치료연구타하료견실적기출;PCR-SSP방법 검측K-ras기인점돌변간편、쾌속、경제차특이성고,유망재림상상성위조기진단화감별진단이선암적실용검측방법.