实验与检验医学
實驗與檢驗醫學
실험여검험의학
EXPERIMENTAL AND LABORATORY MEDICINE
2008年
1期
27-29
,共3页
梅毒螺旋体/TpN47基因%大肠杆菌/ItB基因%融合基因%克隆/表达
梅毒螺鏇體/TpN47基因%大腸桿菌/ItB基因%融閤基因%剋隆/錶達
매독라선체/TpN47기인%대장간균/ItB기인%융합기인%극륭/표체
目的 分别从梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)临床菌株和大肠杆菌DNA中扩增ltB和TON47基因,构建ltB-TpN47融合基因及其原核表达系统.方法 采用PCR分别从上述菌株DNA中扩增TpN47基因和ltB基因片段、构建ltB-TpN47融合基因,T-A克隆后测定核苷酸序列.采用质粒pET32和宿主菌E.coli BL21 DE3构建ltB-TpN47融合基因原核表达系统,并用不同浓度的IPTG诱导表达.结果 所构建的ltB-TpN47融合基因核苷酸序列与从GeneBank中查询并处理得出的数据基本一致.所构建的表达系统pET32-ltB-TpN47的目的重组蛋白(rltB-TpN47)表达量高达细菌总蛋白的1/3左右.结论 本文成功地构建了ltB-TpN47融合基因高效原核表达系统.
目的 分彆從梅毒螺鏇體(Treponema pallidum,Tp)臨床菌株和大腸桿菌DNA中擴增ltB和TON47基因,構建ltB-TpN47融閤基因及其原覈錶達繫統.方法 採用PCR分彆從上述菌株DNA中擴增TpN47基因和ltB基因片段、構建ltB-TpN47融閤基因,T-A剋隆後測定覈苷痠序列.採用質粒pET32和宿主菌E.coli BL21 DE3構建ltB-TpN47融閤基因原覈錶達繫統,併用不同濃度的IPTG誘導錶達.結果 所構建的ltB-TpN47融閤基因覈苷痠序列與從GeneBank中查詢併處理得齣的數據基本一緻.所構建的錶達繫統pET32-ltB-TpN47的目的重組蛋白(rltB-TpN47)錶達量高達細菌總蛋白的1/3左右.結論 本文成功地構建瞭ltB-TpN47融閤基因高效原覈錶達繫統.
목적 분별종매독라선체(Treponema pallidum,Tp)림상균주화대장간균DNA중확증ltB화TON47기인,구건ltB-TpN47융합기인급기원핵표체계통.방법 채용PCR분별종상술균주DNA중확증TpN47기인화ltB기인편단、구건ltB-TpN47융합기인,T-A극륭후측정핵감산서렬.채용질립pET32화숙주균E.coli BL21 DE3구건ltB-TpN47융합기인원핵표체계통,병용불동농도적IPTG유도표체.결과 소구건적ltB-TpN47융합기인핵감산서렬여종GeneBank중사순병처리득출적수거기본일치.소구건적표체계통pET32-ltB-TpN47적목적중조단백(rltB-TpN47)표체량고체세균총단백적1/3좌우.결론 본문성공지구건료ltB-TpN47융합기인고효원핵표체계통.
