中南大学学报(医学版)
中南大學學報(醫學版)
중남대학학보(의학판)
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY（MEDICAL SCIENCES）
2007年
6期
1002-1006
,共5页
刘梅冬%刘瑛%刘俊文%张华莉%肖献忠
劉梅鼕%劉瑛%劉俊文%張華莉%肖獻忠
류매동%류영%류준문%장화리%초헌충
KLF4%基因转染%Raw264.7细胞%细胞凋亡%热应激
KLF4%基因轉染%Raw264.7細胞%細胞凋亡%熱應激
KLF4%기인전염%Raw264.7세포%세포조망%열응격
目的:探讨Krüppel样因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)对热应激所致Raw264.7巨噬细胞凋亡的影响.方法:构建pcDNA3.1-KLF4真核表达质粒,采用脂质体转染法建立KLF4过表达Raw264.7巨噬细胞株,用免疫印迹法检测KLF4的过表达,采用热应激(42 ℃)处理稳定表达小鼠KLF4基因的Raw264.7巨噬细胞1 h,37 ℃恢复12 h,采用流式细胞术、Hoechest33258染色及DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡.结果:获得了KLF4过表达的Raw264.7细胞株,流式细胞术结果显示,转空载体组和KLF4过表达组细胞凋亡百分率较热应激前均升高,但与转空载体组相比较KLF4过表达组升高更明显;荧光染色可见细胞出现核固缩、凋亡小体等凋亡形态学改变;KLF4过表达细胞琼脂糖凝胶电泳能检测到明显的DNA"梯状条带".结论:KLF4可以促进热应激所致Raw264.7巨噬细胞凋亡.
目的:探討Krüppel樣因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)對熱應激所緻Raw264.7巨噬細胞凋亡的影響.方法:構建pcDNA3.1-KLF4真覈錶達質粒,採用脂質體轉染法建立KLF4過錶達Raw264.7巨噬細胞株,用免疫印跡法檢測KLF4的過錶達,採用熱應激(42 ℃)處理穩定錶達小鼠KLF4基因的Raw264.7巨噬細胞1 h,37 ℃恢複12 h,採用流式細胞術、Hoechest33258染色及DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測細胞凋亡.結果:穫得瞭KLF4過錶達的Raw264.7細胞株,流式細胞術結果顯示,轉空載體組和KLF4過錶達組細胞凋亡百分率較熱應激前均升高,但與轉空載體組相比較KLF4過錶達組升高更明顯;熒光染色可見細胞齣現覈固縮、凋亡小體等凋亡形態學改變;KLF4過錶達細胞瓊脂糖凝膠電泳能檢測到明顯的DNA"梯狀條帶".結論:KLF4可以促進熱應激所緻Raw264.7巨噬細胞凋亡.
목적:탐토Krüppel양인자4(Krüppel-like factor 4,KLF4)대열응격소치Raw264.7거서세포조망적영향.방법:구건pcDNA3.1-KLF4진핵표체질립,채용지질체전염법건립KLF4과표체Raw264.7거서세포주,용면역인적법검측KLF4적과표체,채용열응격(42 ℃)처리은정표체소서KLF4기인적Raw264.7거서세포1 h,37 ℃회복12 h,채용류식세포술、Hoechest33258염색급DNA경지당응효전영검측세포조망.결과:획득료KLF4과표체적Raw264.7세포주,류식세포술결과현시,전공재체조화KLF4과표체조세포조망백분솔교열응격전균승고,단여전공재체조상비교KLF4과표체조승고경명현;형광염색가견세포출현핵고축、조망소체등조망형태학개변;KLF4과표체세포경지당응효전영능검측도명현적DNA"제상조대".결론:KLF4가이촉진열응격소치Raw264.7거서세포조망.
