安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2012年
5期
489-492
,共4页
伍锦凤%王萍%任翠平%刘淼%邓松华%沈际佳
伍錦鳳%王萍%任翠平%劉淼%鄧鬆華%瀋際佳
오금봉%왕평%임취평%류묘%산송화%침제가
日本血吸虫%分泌代谢抗原%凝胶电泳%酶联免疫吸附试验%免疫印迹
日本血吸蟲%分泌代謝抗原%凝膠電泳%酶聯免疫吸附試驗%免疫印跡
일본혈흡충%분비대사항원%응효전영%매련면역흡부시험%면역인적
目的 制备日本血吸虫成虫分泌代谢抗原,对其免疫原性以及免疫反应性进行初步鉴定.方法 日本血吸虫尾蚴感染家兔,42 d后剖杀获取成虫,将虫体置无血清DMEM培养基中,5% CO2孵箱37℃培养4 h,得到成虫分泌代谢抗原;用该抗原免疫小鼠,ELISA法检测小鼠血清特异性抗体反应;用该抗原包板,ELISA法检测血吸虫感染人血清抗体效价;采用十二烷基硫酸钠聚丙酰烯胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对其组分进行分析,然后用Western blot分析其对抗成虫分泌代谢抗原单抗发生反应的蛋白条带.结果 成功制备日本血吸虫成虫分泌代谢抗原;免疫小鼠可产生较高滴度(1:16 000)抗体反应;急性血吸虫病患者、慢性血吸虫病患者、晚期血吸虫病患者和钩虫病患者血清抗该抗原的抗体效价分别为1:800、1:400、1:800和1:100,华支睾吸虫患者和正常人血清均为阴性;SDS-PAGE显示其具有4条蛋白条带,分子量分别是13、40、60和180 ku左右;Western blot结果 表明该抗原能够被抗成虫分泌代谢抗原单抗在5 ku左右处识别.结论 制备的日本血吸虫成虫分泌代谢抗原具有较强的免疫原性和免疫反应性.
目的 製備日本血吸蟲成蟲分泌代謝抗原,對其免疫原性以及免疫反應性進行初步鑒定.方法 日本血吸蟲尾蚴感染傢兔,42 d後剖殺穫取成蟲,將蟲體置無血清DMEM培養基中,5% CO2孵箱37℃培養4 h,得到成蟲分泌代謝抗原;用該抗原免疫小鼠,ELISA法檢測小鼠血清特異性抗體反應;用該抗原包闆,ELISA法檢測血吸蟲感染人血清抗體效價;採用十二烷基硫痠鈉聚丙酰烯胺凝膠電泳(SDS-PAGE)對其組分進行分析,然後用Western blot分析其對抗成蟲分泌代謝抗原單抗髮生反應的蛋白條帶.結果 成功製備日本血吸蟲成蟲分泌代謝抗原;免疫小鼠可產生較高滴度(1:16 000)抗體反應;急性血吸蟲病患者、慢性血吸蟲病患者、晚期血吸蟲病患者和鉤蟲病患者血清抗該抗原的抗體效價分彆為1:800、1:400、1:800和1:100,華支睪吸蟲患者和正常人血清均為陰性;SDS-PAGE顯示其具有4條蛋白條帶,分子量分彆是13、40、60和180 ku左右;Western blot結果 錶明該抗原能夠被抗成蟲分泌代謝抗原單抗在5 ku左右處識彆.結論 製備的日本血吸蟲成蟲分泌代謝抗原具有較彊的免疫原性和免疫反應性.
목적 제비일본혈흡충성충분비대사항원,대기면역원성이급면역반응성진행초보감정.방법 일본혈흡충미유감염가토,42 d후부살획취성충,장충체치무혈청DMEM배양기중,5% CO2부상37℃배양4 h,득도성충분비대사항원;용해항원면역소서,ELISA법검측소서혈청특이성항체반응;용해항원포판,ELISA법검측혈흡충감염인혈청항체효개;채용십이완기류산납취병선희알응효전영(SDS-PAGE)대기조분진행분석,연후용Western blot분석기대항성충분비대사항원단항발생반응적단백조대.결과 성공제비일본혈흡충성충분비대사항원;면역소서가산생교고적도(1:16 000)항체반응;급성혈흡충병환자、만성혈흡충병환자、만기혈흡충병환자화구충병환자혈청항해항원적항체효개분별위1:800、1:400、1:800화1:100,화지고흡충환자화정상인혈청균위음성;SDS-PAGE현시기구유4조단백조대,분자량분별시13、40、60화180 ku좌우;Western blot결과 표명해항원능구피항성충분비대사항원단항재5 ku좌우처식별.결론 제비적일본혈흡충성충분비대사항원구유교강적면역원성화면역반응성.
