中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2007年
11期
1464-1466
,共3页
脱氧核酶%AFPmRNA%AFP%RT-PCR
脫氧覈酶%AFPmRNA%AFP%RT-PCR
탈양핵매%AFPmRNA%AFP%RT-PCR
目的 本研究针对AFPmRNA(甲胎蛋白mRNA)设计脱氧核酶,观察其切割AFPmRNA的有效性,探索脱氧核酶在肝癌基因治疗的可能性.方法 体外转录AFPmRNA底物,设计并合成DZ(脱氧核酶)、DZs(硫代修饰脱氧核酶,序列同DZ,但两侧各有两个脱氧核苷酸进行了硫代修饰)、ASO(反义寡聚脱氧核苷酸)、无关DZ对照.体外切割AF-PmRNA;经转染试剂将脱氧核酶转染入肝癌细胞HepG2,利用RT-PCR法检测AFPmRNA水平的变化;免疫细胞化学及图像分析系统检测AFP蛋白质表达情况;MTT法初步估计肝癌细胞的生长效应.结果 DZ与DZs在体外均可切割AFPmRNA底物;经转染DZ、DZs的细胞均下降AFPmRNA的水平,而且DZs的作用更强;经转染DZ与DZs的细胞均下降AFP的表达,ASO也略下降AFP的表达;DZ、DZs有抑制细胞生长的作用.结论 本实验设计的脱氧核酶能在细胞外有效切割AFPmRNA;在细胞内也能切割AFPmRNA、抑制AFP的表达、抑制肝癌细胞的生长,为肝癌的基因治疗提供可能性.
目的 本研究針對AFPmRNA(甲胎蛋白mRNA)設計脫氧覈酶,觀察其切割AFPmRNA的有效性,探索脫氧覈酶在肝癌基因治療的可能性.方法 體外轉錄AFPmRNA底物,設計併閤成DZ(脫氧覈酶)、DZs(硫代脩飾脫氧覈酶,序列同DZ,但兩側各有兩箇脫氧覈苷痠進行瞭硫代脩飾)、ASO(反義寡聚脫氧覈苷痠)、無關DZ對照.體外切割AF-PmRNA;經轉染試劑將脫氧覈酶轉染入肝癌細胞HepG2,利用RT-PCR法檢測AFPmRNA水平的變化;免疫細胞化學及圖像分析繫統檢測AFP蛋白質錶達情況;MTT法初步估計肝癌細胞的生長效應.結果 DZ與DZs在體外均可切割AFPmRNA底物;經轉染DZ、DZs的細胞均下降AFPmRNA的水平,而且DZs的作用更彊;經轉染DZ與DZs的細胞均下降AFP的錶達,ASO也略下降AFP的錶達;DZ、DZs有抑製細胞生長的作用.結論 本實驗設計的脫氧覈酶能在細胞外有效切割AFPmRNA;在細胞內也能切割AFPmRNA、抑製AFP的錶達、抑製肝癌細胞的生長,為肝癌的基因治療提供可能性.
목적 본연구침대AFPmRNA(갑태단백mRNA)설계탈양핵매,관찰기절할AFPmRNA적유효성,탐색탈양핵매재간암기인치료적가능성.방법 체외전록AFPmRNA저물,설계병합성DZ(탈양핵매)、DZs(류대수식탈양핵매,서렬동DZ,단량측각유량개탈양핵감산진행료류대수식)、ASO(반의과취탈양핵감산)、무관DZ대조.체외절할AF-PmRNA;경전염시제장탈양핵매전염입간암세포HepG2,이용RT-PCR법검측AFPmRNA수평적변화;면역세포화학급도상분석계통검측AFP단백질표체정황;MTT법초보고계간암세포적생장효응.결과 DZ여DZs재체외균가절할AFPmRNA저물;경전염DZ、DZs적세포균하강AFPmRNA적수평,이차DZs적작용경강;경전염DZ여DZs적세포균하강AFP적표체,ASO야략하강AFP적표체;DZ、DZs유억제세포생장적작용.결론 본실험설계적탈양핵매능재세포외유효절할AFPmRNA;재세포내야능절할AFPmRNA、억제AFP적표체、억제간암세포적생장,위간암적기인치료제공가능성.
