中国农业科技导报
中國農業科技導報
중국농업과기도보
REVIEW OF CHINA AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY
2007年
6期
71-77
,共7页
周培%邹竹荣%曹丽娟%苏裕
週培%鄒竹榮%曹麗娟%囌裕
주배%추죽영%조려연%소유
蜘蛛丝蛋白%基因合成%串联体%蛋白质表达%大肠杆菌
蜘蛛絲蛋白%基因閤成%串聯體%蛋白質錶達%大腸桿菌
지주사단백%기인합성%천련체%단백질표체%대장간균
赋有许多独特性能的天然蛋白质纤维--蜘蛛丝在生物医学、材料和军事等领域具有广泛的应用前景,但惟有通过基因工程手段才能大量获取.根据已报道的蜘蛛丝蛋白的氨基酸序列,结合蜘蛛丝蛋白的模块结构特性和功能的关系,优化设计并人工合成了全长为429 bp的蜘蛛丝蛋白基因SPS.将该基因克隆到质粒pET-32a中,构建成表达载体pET-SPS1,并进一步构建了它的多个串联体表达载体pET-SPS(2～8).所有表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了诱导表达,重组蜘蛛丝蛋白得到了纯化.结果表明,合成的蜘蛛丝蛋白基因与预期一致,融合表达的蜘蛛丝蛋白几乎全部可溶.其中,1～3串联体蜘蛛丝蛋白基因能够有效表达,但随着串联数的进一步增加,蜘蛛丝蛋白基因融合表达效率下降,初步探讨了下降的可能原因.
賦有許多獨特性能的天然蛋白質纖維--蜘蛛絲在生物醫學、材料和軍事等領域具有廣汎的應用前景,但惟有通過基因工程手段纔能大量穫取.根據已報道的蜘蛛絲蛋白的氨基痠序列,結閤蜘蛛絲蛋白的模塊結構特性和功能的關繫,優化設計併人工閤成瞭全長為429 bp的蜘蛛絲蛋白基因SPS.將該基因剋隆到質粒pET-32a中,構建成錶達載體pET-SPS1,併進一步構建瞭它的多箇串聯體錶達載體pET-SPS(2～8).所有錶達載體在大腸桿菌BL21(DE3)中進行瞭誘導錶達,重組蜘蛛絲蛋白得到瞭純化.結果錶明,閤成的蜘蛛絲蛋白基因與預期一緻,融閤錶達的蜘蛛絲蛋白幾乎全部可溶.其中,1～3串聯體蜘蛛絲蛋白基因能夠有效錶達,但隨著串聯數的進一步增加,蜘蛛絲蛋白基因融閤錶達效率下降,初步探討瞭下降的可能原因.
부유허다독특성능적천연단백질섬유--지주사재생물의학、재료화군사등영역구유엄범적응용전경,단유유통과기인공정수단재능대량획취.근거이보도적지주사단백적안기산서렬,결합지주사단백적모괴결구특성화공능적관계,우화설계병인공합성료전장위429 bp적지주사단백기인SPS.장해기인극륭도질립pET-32a중,구건성표체재체pET-SPS1,병진일보구건료타적다개천련체표체재체pET-SPS(2～8).소유표체재체재대장간균BL21(DE3)중진행료유도표체,중조지주사단백득도료순화.결과표명,합성적지주사단백기인여예기일치,융합표체적지주사단백궤호전부가용.기중,1～3천련체지주사단백기인능구유효표체,단수착천련수적진일보증가,지주사단백기인융합표체효솔하강,초보탐토료하강적가능원인.
