化学学报
化學學報
화학학보
ACTA CHIMICA SINICA
2007年
22期
2563-2569
,共7页
彭方毅%何苗%盛建武%施汉昌
彭方毅%何苗%盛建武%施漢昌
팽방의%하묘%성건무%시한창
硝基苯胺%完全抗原%多克隆抗体%酶联免疫(ELISA)
硝基苯胺%完全抗原%多剋隆抗體%酶聯免疫(ELISA)
초기분알%완전항원%다극륭항체%매련면역(ELISA)
采用戊二醛法,将4-硝基苯乙胺与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)共价偶联,分别合成了免疫原4-硝基苯乙胺-BSA和包被原4-硝基苯乙胺-OVA,经紫外分光光度计及飞行时间质谱扫描鉴定.用合成的免疫抗原免疫新西兰大白兔,并用合成的包被原进行间接竞争酶联免疫(ELISA)试验,获得的抗血清效价达1∶32000.方阵实验确定了包被抗原最佳浓度(0.5 mg/L)及抗血清最佳稀释度(1∶6000),并建立了间接竞争ELISA方法.工作曲线表明在1～1000 μg/L浓度范围内呈良好的线性关系,该法IC50值为(52.73±2.67)μg/L,检测限为5.12 μg/L.其它类似结构不干扰硝基苯胺的测定.成功地建立了硝基苯胺类化合物的间接竞争酶免疫化学分析方法.
採用戊二醛法,將4-硝基苯乙胺與牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)共價偶聯,分彆閤成瞭免疫原4-硝基苯乙胺-BSA和包被原4-硝基苯乙胺-OVA,經紫外分光光度計及飛行時間質譜掃描鑒定.用閤成的免疫抗原免疫新西蘭大白兔,併用閤成的包被原進行間接競爭酶聯免疫(ELISA)試驗,穫得的抗血清效價達1∶32000.方陣實驗確定瞭包被抗原最佳濃度(0.5 mg/L)及抗血清最佳稀釋度(1∶6000),併建立瞭間接競爭ELISA方法.工作麯線錶明在1～1000 μg/L濃度範圍內呈良好的線性關繫,該法IC50值為(52.73±2.67)μg/L,檢測限為5.12 μg/L.其它類似結構不榦擾硝基苯胺的測定.成功地建立瞭硝基苯胺類化閤物的間接競爭酶免疫化學分析方法.
채용무이철법,장4-초기분을알여우혈청단백(BSA)화란청단백(OVA)공개우련,분별합성료면역원4-초기분을알-BSA화포피원4-초기분을알-OVA,경자외분광광도계급비행시간질보소묘감정.용합성적면역항원면역신서란대백토,병용합성적포피원진행간접경쟁매련면역(ELISA)시험,획득적항혈청효개체1∶32000.방진실험학정료포피항원최가농도(0.5 mg/L)급항혈청최가희석도(1∶6000),병건립료간접경쟁ELISA방법.공작곡선표명재1～1000 μg/L농도범위내정량호적선성관계,해법IC50치위(52.73±2.67)μg/L,검측한위5.12 μg/L.기타유사결구불간우초기분알적측정.성공지건립료초기분알류화합물적간접경쟁매면역화학분석방법.
