安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2007年
24期
7410-7411
,共2页
刘伟%邵菁%庞宏%张锡然%曹祥荣
劉偉%邵菁%龐宏%張錫然%曹祥榮
류위%소정%방굉%장석연%조상영
cDNA文库%表达序列标签%菌液电泳%筛选
cDNA文庫%錶達序列標籤%菌液電泳%篩選
cDNA문고%표체서렬표첨%균액전영%사선
介绍一种改进的大规模ESTs筛选的方法.以SMARTTM cDNA Library Construction Kit所构建的毛冠鹿大脑cDNA文库为研究材料,基于该文库噬菌体可自发转化为质粒的特点,直接把噬菌体文库转化为质粒文库.随机选取平板中转化后的质粒cDNA文库克隆,振荡培养后运用菌液电泳的方法代替传统的PCR筛选法,对重组克隆进行筛选.改进的菌液电泳法可以准确鉴定出重组的质粒,并估计出插入片段的大小.该方法能更好地保持SMARTTM cDNA Library Construction Kit所构建文库的完整性,是一种简单、高效、适用于大规模表达序列标签筛选的有效方法.
介紹一種改進的大規模ESTs篩選的方法.以SMARTTM cDNA Library Construction Kit所構建的毛冠鹿大腦cDNA文庫為研究材料,基于該文庫噬菌體可自髮轉化為質粒的特點,直接把噬菌體文庫轉化為質粒文庫.隨機選取平闆中轉化後的質粒cDNA文庫剋隆,振盪培養後運用菌液電泳的方法代替傳統的PCR篩選法,對重組剋隆進行篩選.改進的菌液電泳法可以準確鑒定齣重組的質粒,併估計齣插入片段的大小.該方法能更好地保持SMARTTM cDNA Library Construction Kit所構建文庫的完整性,是一種簡單、高效、適用于大規模錶達序列標籤篩選的有效方法.
개소일충개진적대규모ESTs사선적방법.이SMARTTM cDNA Library Construction Kit소구건적모관록대뇌cDNA문고위연구재료,기우해문고서균체가자발전화위질립적특점,직접파서균체문고전화위질립문고.수궤선취평판중전화후적질립cDNA문고극륭,진탕배양후운용균액전영적방법대체전통적PCR사선법,대중조극륭진행사선.개진적균액전영법가이준학감정출중조적질립,병고계출삽입편단적대소.해방법능경호지보지SMARTTM cDNA Library Construction Kit소구건문고적완정성,시일충간단、고효、괄용우대규모표체서렬표첨사선적유효방법.