中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2012年
9期
74-79
,共6页
李治利%秦清明%施振旦%陈海南%黄群山
李治利%秦清明%施振旦%陳海南%黃群山
리치리%진청명%시진단%진해남%황군산
CHD1基因%PCR%全血%性别鉴定%鸡胚%雏鸡
CHD1基因%PCR%全血%性彆鑒定%鷄胚%雛鷄
CHD1기인%PCR%전혈%성별감정%계배%추계
为了便于常规PCR技术在鸡性别鉴定上的推广和应用,本研究以成年家鸡全血为模板,应用常规PCR反应缓冲液和Tap DNA聚合酶直接进行PCR扩增,对50μL PCR反应体系中的血样(0.05～4.0 μL)和Tap DNA聚合酶的使用量(0.05～1.5 uL),以及循环次数(30～40)进行了优化,在此基础上对血样的抗凝剂和保存温度进行了探讨,并对62只1日龄雏鸡、80枚12日龄和80枚16日龄鸡胚的血样直接PCR进行了性别鉴定.结果表明,采集血样时可以使用ACD、肝素或EDTA作为抗凝剂,血样可以在4、-20或-80℃至少保存3个月；使用0.1μL全血就能完成雏鸡和鸡胚性别鉴定,全血PCR鉴定性别与性腺性别的符合度为100％.与常规PCR相比,全血PCR节约了检测成本,提高了检测效率,减少了交叉污染可能.
為瞭便于常規PCR技術在鷄性彆鑒定上的推廣和應用,本研究以成年傢鷄全血為模闆,應用常規PCR反應緩遲液和Tap DNA聚閤酶直接進行PCR擴增,對50μL PCR反應體繫中的血樣(0.05～4.0 μL)和Tap DNA聚閤酶的使用量(0.05～1.5 uL),以及循環次數(30～40)進行瞭優化,在此基礎上對血樣的抗凝劑和保存溫度進行瞭探討,併對62隻1日齡雛鷄、80枚12日齡和80枚16日齡鷄胚的血樣直接PCR進行瞭性彆鑒定.結果錶明,採集血樣時可以使用ACD、肝素或EDTA作為抗凝劑,血樣可以在4、-20或-80℃至少保存3箇月；使用0.1μL全血就能完成雛鷄和鷄胚性彆鑒定,全血PCR鑒定性彆與性腺性彆的符閤度為100％.與常規PCR相比,全血PCR節約瞭檢測成本,提高瞭檢測效率,減少瞭交扠汙染可能.
위료편우상규PCR기술재계성별감정상적추엄화응용,본연구이성년가계전혈위모판,응용상규PCR반응완충액화Tap DNA취합매직접진행PCR확증,대50μL PCR반응체계중적혈양(0.05～4.0 μL)화Tap DNA취합매적사용량(0.05～1.5 uL),이급순배차수(30～40)진행료우화,재차기출상대혈양적항응제화보존온도진행료탐토,병대62지1일령추계、80매12일령화80매16일령계배적혈양직접PCR진행료성별감정.결과표명,채집혈양시가이사용ACD、간소혹EDTA작위항응제,혈양가이재4、-20혹-80℃지소보존3개월；사용0.1μL전혈취능완성추계화계배성별감정,전혈PCR감정성별여성선성별적부합도위100％.여상규PCR상비,전혈PCR절약료검측성본,제고료검측효솔,감소료교차오염가능.
