中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2007年
2期
282-285
,共4页
赵占胜%金玉怀%丛斌%徐锦荣%李淑瑾%姚玉霞%凌亦凌
趙佔勝%金玉懷%叢斌%徐錦榮%李淑瑾%姚玉霞%凌亦凌
조점성%금옥부%총빈%서금영%리숙근%요옥하%릉역릉
关节炎,类风湿%辛卡利特%滑膜/细胞学%受体%NF-κB
關節炎,類風濕%辛卡利特%滑膜/細胞學%受體%NF-κB
관절염,류풍습%신잡리특%활막/세포학%수체%NF-κB
目的:观察硫酸化八肽胆囊收缩素(cholecystokinin octapeptide,CCK-8)对肿瘤坏死因子α诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364核因子κB的影响,以及CCK-A/B受体是否参与这一过程.方法:实验于2003-02/2004-02在河北医科大学法医学教研室分子生物学实验室完成.取大鼠滑膜细胞株RSC-364经肿瘤坏死因子α(10μg/L)、sCCK-8(10-8,10-7,10-6mol/L)、CCK受体拮抗剂丙谷胺及溶剂单独或联合应用孵育:①孵育3 h,用反转录-聚合酶链反应技术检测细胞CCK-A受体及CCK-B受体mRNA的表达.②孵育1 h,用电泳迁移率检测核因子κB相对活性.③孵育30 min,用Western blot检测胞浆IκB蛋白表达的相对水平.结果:①细胞CCK-A受体及CCK-B受体mRNA的表达:RSC-364细胞固有表达CCK-A/B受体,肿瘤坏死因子α(10 μg/L)可使CCK-A受体和CCK-B受体mRNA的表达分别上调148%和173%(P＜0.01).肿瘤坏死因子α和CCK-8(10-810-6 mol/L)联合孵育细胞,CCK-A受体和CCK-B受体mRNA表达与肿瘤坏死因子α组相比分别增高47%,56%,30%和57%,13%,24%(P＜0.05,0.01).②核因子κB相对活性:肿瘤坏死因子α组明显高于对照组(294.45±36.48,0,P＜0.01);肿瘤坏死因子α+CCK-8 10-8,10-7,10-6 mol/L组高于肿瘤坏死因子α组(470.69±56.76,489.37±64.95,558.90±74.15,P＜0.05,0.01);CCK-8的作用可被丙谷胺减弱(400.79±39.06).③IκB蛋白表达的相对水平:肿瘤坏死因子α组明显低于对照组(139.43±30.76,220.79±34.58,P＜0.01),肿瘤坏死因子α+CCK-8 10-8,10-7,10-6 mol/L组低于肿瘤坏死因子α组(95.26±8.54,84.15±8.77,63.28±16 13,P＜0.05),并可被丙谷胺所抑制(137.22±20.33,P＜0.01).结论:CCK-8对肿瘤坏死因子α诱导的RSC-364核因子κB活性具有正向调节作用,并能降低IκBα蛋白水平,提示CCK-8在类风湿性关节炎发病过程中可能具有调控作用,此作用可能通过滑膜细胞上的CCK受体实现.
目的:觀察硫痠化八肽膽囊收縮素(cholecystokinin octapeptide,CCK-8)對腫瘤壞死因子α誘導大鼠滑膜細胞株RSC-364覈因子κB的影響,以及CCK-A/B受體是否參與這一過程.方法:實驗于2003-02/2004-02在河北醫科大學法醫學教研室分子生物學實驗室完成.取大鼠滑膜細胞株RSC-364經腫瘤壞死因子α(10μg/L)、sCCK-8(10-8,10-7,10-6mol/L)、CCK受體拮抗劑丙穀胺及溶劑單獨或聯閤應用孵育:①孵育3 h,用反轉錄-聚閤酶鏈反應技術檢測細胞CCK-A受體及CCK-B受體mRNA的錶達.②孵育1 h,用電泳遷移率檢測覈因子κB相對活性.③孵育30 min,用Western blot檢測胞漿IκB蛋白錶達的相對水平.結果:①細胞CCK-A受體及CCK-B受體mRNA的錶達:RSC-364細胞固有錶達CCK-A/B受體,腫瘤壞死因子α(10 μg/L)可使CCK-A受體和CCK-B受體mRNA的錶達分彆上調148%和173%(P＜0.01).腫瘤壞死因子α和CCK-8(10-810-6 mol/L)聯閤孵育細胞,CCK-A受體和CCK-B受體mRNA錶達與腫瘤壞死因子α組相比分彆增高47%,56%,30%和57%,13%,24%(P＜0.05,0.01).②覈因子κB相對活性:腫瘤壞死因子α組明顯高于對照組(294.45±36.48,0,P＜0.01);腫瘤壞死因子α+CCK-8 10-8,10-7,10-6 mol/L組高于腫瘤壞死因子α組(470.69±56.76,489.37±64.95,558.90±74.15,P＜0.05,0.01);CCK-8的作用可被丙穀胺減弱(400.79±39.06).③IκB蛋白錶達的相對水平:腫瘤壞死因子α組明顯低于對照組(139.43±30.76,220.79±34.58,P＜0.01),腫瘤壞死因子α+CCK-8 10-8,10-7,10-6 mol/L組低于腫瘤壞死因子α組(95.26±8.54,84.15±8.77,63.28±16 13,P＜0.05),併可被丙穀胺所抑製(137.22±20.33,P＜0.01).結論:CCK-8對腫瘤壞死因子α誘導的RSC-364覈因子κB活性具有正嚮調節作用,併能降低IκBα蛋白水平,提示CCK-8在類風濕性關節炎髮病過程中可能具有調控作用,此作用可能通過滑膜細胞上的CCK受體實現.
목적:관찰류산화팔태담낭수축소(cholecystokinin octapeptide,CCK-8)대종류배사인자α유도대서활막세포주RSC-364핵인자κB적영향,이급CCK-A/B수체시부삼여저일과정.방법:실험우2003-02/2004-02재하북의과대학법의학교연실분자생물학실험실완성.취대서활막세포주RSC-364경종류배사인자α(10μg/L)、sCCK-8(10-8,10-7,10-6mol/L)、CCK수체길항제병곡알급용제단독혹연합응용부육:①부육3 h,용반전록-취합매련반응기술검측세포CCK-A수체급CCK-B수체mRNA적표체.②부육1 h,용전영천이솔검측핵인자κB상대활성.③부육30 min,용Western blot검측포장IκB단백표체적상대수평.결과:①세포CCK-A수체급CCK-B수체mRNA적표체:RSC-364세포고유표체CCK-A/B수체,종류배사인자α(10 μg/L)가사CCK-A수체화CCK-B수체mRNA적표체분별상조148%화173%(P＜0.01).종류배사인자α화CCK-8(10-810-6 mol/L)연합부육세포,CCK-A수체화CCK-B수체mRNA표체여종류배사인자α조상비분별증고47%,56%,30%화57%,13%,24%(P＜0.05,0.01).②핵인자κB상대활성:종류배사인자α조명현고우대조조(294.45±36.48,0,P＜0.01);종류배사인자α+CCK-8 10-8,10-7,10-6 mol/L조고우종류배사인자α조(470.69±56.76,489.37±64.95,558.90±74.15,P＜0.05,0.01);CCK-8적작용가피병곡알감약(400.79±39.06).③IκB단백표체적상대수평:종류배사인자α조명현저우대조조(139.43±30.76,220.79±34.58,P＜0.01),종류배사인자α+CCK-8 10-8,10-7,10-6 mol/L조저우종류배사인자α조(95.26±8.54,84.15±8.77,63.28±16 13,P＜0.05),병가피병곡알소억제(137.22±20.33,P＜0.01).결론:CCK-8대종류배사인자α유도적RSC-364핵인자κB활성구유정향조절작용,병능강저IκBα단백수평,제시CCK-8재류풍습성관절염발병과정중가능구유조공작용,차작용가능통과활막세포상적CCK수체실현.
