实验动物与比较医学
實驗動物與比較醫學
실험동물여비교의학
LABORATORY ANIMAL AND COMPARATIVE MEDICINE
2006年
1期
23-27
,共5页
周光斌%侯云鹏%杨中强%杨其恩%李秀伟%朱士恩
週光斌%侯雲鵬%楊中彊%楊其恩%李秀偉%硃士恩
주광빈%후운붕%양중강%양기은%리수위%주사은
OPS法%玻璃化冷冻%ε-细胞胚胎%小鼠%生存发育率
OPS法%玻璃化冷凍%ε-細胞胚胎%小鼠%生存髮育率
OPS법%파리화냉동%ε-세포배태%소서%생존발육솔
目的为实验动物、家畜和人类胚胎的冷冻保存探索简易、高效的玻璃化冷冻程序.方法以小鼠8-细胞胚胎为材料,在25℃室温和37℃恒温台条件下,利用玻璃化冷冻溶液EDFS30,对小鼠8-细胞胚胎进行玻璃化冷冻保存,解冻后培养60 h后的囊胚发育率为其体外发育能力的考核指标,同时对解冻后培养1～3 h的胚胎进行移植以判定其体内发育潜力.OPS(Open-pulledstraw)两步法冷冻保存,即胚胎首先移入预处理液(10%EG+10%DMSO)中平衡30 s,再移入玻璃化溶液中吸入OPS平衡15、25、35、45和60 s连同胚胎直接投入液氮中冷冻保存.结果小鼠胚胎8-细胞冷冻后囊胚发育率最佳组高达95.6%,与对照组(96.8%)差异无统计学意义(P＞0.05).利用最佳冷冻组获得的165枚胚胎移植于11只假孕63～67 h的受体母鼠,结果有4只妊娠,产仔23只,妊娠产仔率为28.3%(23/60),与对照组37.9%(22/58)差异无统计学意义(P＞0.05).结论EDFS30为玻璃化冷冻液,OPS两步法能有效地冷冻保存小鼠8-细胞胚胎.
目的為實驗動物、傢畜和人類胚胎的冷凍保存探索簡易、高效的玻璃化冷凍程序.方法以小鼠8-細胞胚胎為材料,在25℃室溫和37℃恆溫檯條件下,利用玻璃化冷凍溶液EDFS30,對小鼠8-細胞胚胎進行玻璃化冷凍保存,解凍後培養60 h後的囊胚髮育率為其體外髮育能力的攷覈指標,同時對解凍後培養1～3 h的胚胎進行移植以判定其體內髮育潛力.OPS(Open-pulledstraw)兩步法冷凍保存,即胚胎首先移入預處理液(10%EG+10%DMSO)中平衡30 s,再移入玻璃化溶液中吸入OPS平衡15、25、35、45和60 s連同胚胎直接投入液氮中冷凍保存.結果小鼠胚胎8-細胞冷凍後囊胚髮育率最佳組高達95.6%,與對照組(96.8%)差異無統計學意義(P＞0.05).利用最佳冷凍組穫得的165枚胚胎移植于11隻假孕63～67 h的受體母鼠,結果有4隻妊娠,產仔23隻,妊娠產仔率為28.3%(23/60),與對照組37.9%(22/58)差異無統計學意義(P＞0.05).結論EDFS30為玻璃化冷凍液,OPS兩步法能有效地冷凍保存小鼠8-細胞胚胎.
목적위실험동물、가축화인류배태적냉동보존탐색간역、고효적파리화냉동정서.방법이소서8-세포배태위재료,재25℃실온화37℃항온태조건하,이용파리화냉동용액EDFS30,대소서8-세포배태진행파리화냉동보존,해동후배양60 h후적낭배발육솔위기체외발육능력적고핵지표,동시대해동후배양1～3 h적배태진행이식이판정기체내발육잠력.OPS(Open-pulledstraw)량보법냉동보존,즉배태수선이입예처리액(10%EG+10%DMSO)중평형30 s,재이입파리화용액중흡입OPS평형15、25、35、45화60 s련동배태직접투입액담중냉동보존.결과소서배태8-세포냉동후낭배발육솔최가조고체95.6%,여대조조(96.8%)차이무통계학의의(P＞0.05).이용최가냉동조획득적165매배태이식우11지가잉63～67 h적수체모서,결과유4지임신,산자23지,임신산자솔위28.3%(23/60),여대조조37.9%(22/58)차이무통계학의의(P＞0.05).결론EDFS30위파리화냉동액,OPS량보법능유효지냉동보존소서8-세포배태.
