畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2005年
7期
701-704
,共4页
吴斌%唐先春%陈焕春%王大鹏
吳斌%唐先春%陳煥春%王大鵬
오빈%당선춘%진환춘%왕대붕
多杀性巴氏杆菌%ompH基因%克隆%原核表达%ELISA
多殺性巴氏桿菌%ompH基因%剋隆%原覈錶達%ELISA
다살성파씨간균%ompH기인%극륭%원핵표체%ELISA
利用已分离的菌株030224HB,根据NCBI上的序列(U52208)设计了一对引物,用PCR方法扩增了猪源多杀性巴氏杆菌的外膜蛋白基因(ompH),扩增的片段大小为1 114 bp(ORF为960 bp),并克隆到载体pMD18-T(T-Vector),测序表明该基因相当保守.用pET-28b构建了原核表达载体pET28b-ompH,转化BL21并诱导表达,SDS-PAGE结果显示表达蛋白约为35 ku,与报道大小相近.Western-blot结果表明表达的蛋白质具有生物学活性,然后用所表达的蛋白做了ELISA检测方法的初步探讨.
利用已分離的菌株030224HB,根據NCBI上的序列(U52208)設計瞭一對引物,用PCR方法擴增瞭豬源多殺性巴氏桿菌的外膜蛋白基因(ompH),擴增的片段大小為1 114 bp(ORF為960 bp),併剋隆到載體pMD18-T(T-Vector),測序錶明該基因相噹保守.用pET-28b構建瞭原覈錶達載體pET28b-ompH,轉化BL21併誘導錶達,SDS-PAGE結果顯示錶達蛋白約為35 ku,與報道大小相近.Western-blot結果錶明錶達的蛋白質具有生物學活性,然後用所錶達的蛋白做瞭ELISA檢測方法的初步探討.
이용이분리적균주030224HB,근거NCBI상적서렬(U52208)설계료일대인물,용PCR방법확증료저원다살성파씨간균적외막단백기인(ompH),확증적편단대소위1 114 bp(ORF위960 bp),병극륭도재체pMD18-T(T-Vector),측서표명해기인상당보수.용pET-28b구건료원핵표체재체pET28b-ompH,전화BL21병유도표체,SDS-PAGE결과현시표체단백약위35 ku,여보도대소상근.Western-blot결과표명표체적단백질구유생물학활성,연후용소표체적단백주료ELISA검측방법적초보탐토.
