现代检验医学杂志
現代檢驗醫學雜誌
현대검험의학잡지
JOURNAL OF MODERN LABORATORY MEDICINE
2005年
6期
4-6
,共3页
饶国洲%李昂%景娟%姚天华%石建锋
饒國洲%李昂%景娟%姚天華%石建鋒
요국주%리앙%경연%요천화%석건봉
RNA%纯化分离%方法
RNA%純化分離%方法
RNA%순화분리%방법
目的建立一种从不同生物体来源的组织材料中进行简单、快速、高纯化分离RNA的方法.方法利用胍盐裂解并抑制RNA的降解,用特异的RNA吸附剂吸附;通过清洗液的清洗和洗脱液洗脱,获得高纯化RNA.并用该方法在HL-60细胞中分离总RNA,进行RT-PCR扩增Human TFR(Transferrin Receptor)基因.结果RNA总得率大于80%;纯度高(A260/2801.9～2.0);产量稳定(平均10～15 μg/1×106细胞,1～5μg/mg组织,2.5～5μg/ml全血,50～100 μg/1×109细菌,10～20μg/1×108酵母菌);时间短(20～45 min),无基因组DNA污染,RNA降解少,完整性较好.Human TFR RT-PCR扩增电泳结果显示出1.0kbp,2.0kbp,4.4kbp的DNA片段.结论该方法操作简便、快速,适应于普通实验室对RNA的分析研究工作.
目的建立一種從不同生物體來源的組織材料中進行簡單、快速、高純化分離RNA的方法.方法利用胍鹽裂解併抑製RNA的降解,用特異的RNA吸附劑吸附;通過清洗液的清洗和洗脫液洗脫,穫得高純化RNA.併用該方法在HL-60細胞中分離總RNA,進行RT-PCR擴增Human TFR(Transferrin Receptor)基因.結果RNA總得率大于80%;純度高(A260/2801.9～2.0);產量穩定(平均10～15 μg/1×106細胞,1～5μg/mg組織,2.5～5μg/ml全血,50～100 μg/1×109細菌,10～20μg/1×108酵母菌);時間短(20～45 min),無基因組DNA汙染,RNA降解少,完整性較好.Human TFR RT-PCR擴增電泳結果顯示齣1.0kbp,2.0kbp,4.4kbp的DNA片段.結論該方法操作簡便、快速,適應于普通實驗室對RNA的分析研究工作.
목적건립일충종불동생물체래원적조직재료중진행간단、쾌속、고순화분리RNA적방법.방법이용고염렬해병억제RNA적강해,용특이적RNA흡부제흡부;통과청세액적청세화세탈액세탈,획득고순화RNA.병용해방법재HL-60세포중분리총RNA,진행RT-PCR확증Human TFR(Transferrin Receptor)기인.결과RNA총득솔대우80%;순도고(A260/2801.9～2.0);산량은정(평균10～15 μg/1×106세포,1～5μg/mg조직,2.5～5μg/ml전혈,50～100 μg/1×109세균,10～20μg/1×108효모균);시간단(20～45 min),무기인조DNA오염,RNA강해소,완정성교호.Human TFR RT-PCR확증전영결과현시출1.0kbp,2.0kbp,4.4kbp적DNA편단.결론해방법조작간편、쾌속,괄응우보통실험실대RNA적분석연구공작.
