感染、炎症、修复
感染、炎癥、脩複
감염、염증、수복
INFECTION， INFLAMMATION， REPAIR
2005年
1期
29-33
,共5页
姚琼凤%王莹%吴晓萍%付小兵%李校堃
姚瓊鳳%王瑩%吳曉萍%付小兵%李校堃
요경봉%왕형%오효평%부소병%리교곤
vasostatin片段%GST融合蛋白%血管生成抑制
vasostatin片段%GST融閤蛋白%血管生成抑製
vasostatin편단%GST융합단백%혈관생성억제
目的:克隆表达人vasostatin片段,纯化目的蛋白并检查活性,以研究人血管抑制因子vasostatin片段的活性区域.方法:重组构建人vasostatin片段和谷胱甘肽S转移酶(GST)融合表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达.通过GST亲和凝胶纯化目的蛋白,用凝血酶(Thrombin)酶切纯化产物获得单体vasostatin片段,并采用MTT法检测其抑制内皮细胞增殖活性.结果:表达产物主要以包涵体形式存在,改变诱导条件可增加可溶性表达量,包涵体形式的表达量约占菌体蛋白总量的55%.活性试验表明,各GST-vasostatin片段和vasoatatin片段具有程度不同的抑制bFGF诱导的内皮细胞增殖的活性,其中以片段vasostatin氨基酸135-164的抑制活性最为显著.结论:人vasostatin片段中氨基酸135-164是抑制内皮细胞增殖活性较强的片段.
目的:剋隆錶達人vasostatin片段,純化目的蛋白併檢查活性,以研究人血管抑製因子vasostatin片段的活性區域.方法:重組構建人vasostatin片段和穀胱甘肽S轉移酶(GST)融閤錶達質粒,轉化大腸桿菌BL21(DE3),IPTG誘導錶達.通過GST親和凝膠純化目的蛋白,用凝血酶(Thrombin)酶切純化產物穫得單體vasostatin片段,併採用MTT法檢測其抑製內皮細胞增殖活性.結果:錶達產物主要以包涵體形式存在,改變誘導條件可增加可溶性錶達量,包涵體形式的錶達量約佔菌體蛋白總量的55%.活性試驗錶明,各GST-vasostatin片段和vasoatatin片段具有程度不同的抑製bFGF誘導的內皮細胞增殖的活性,其中以片段vasostatin氨基痠135-164的抑製活性最為顯著.結論:人vasostatin片段中氨基痠135-164是抑製內皮細胞增殖活性較彊的片段.
목적:극륭표체인vasostatin편단,순화목적단백병검사활성,이연구인혈관억제인자vasostatin편단적활성구역.방법:중조구건인vasostatin편단화곡광감태S전이매(GST)융합표체질립,전화대장간균BL21(DE3),IPTG유도표체.통과GST친화응효순화목적단백,용응혈매(Thrombin)매절순화산물획득단체vasostatin편단,병채용MTT법검측기억제내피세포증식활성.결과:표체산물주요이포함체형식존재,개변유도조건가증가가용성표체량,포함체형식적표체량약점균체단백총량적55%.활성시험표명,각GST-vasostatin편단화vasoatatin편단구유정도불동적억제bFGF유도적내피세포증식적활성,기중이편단vasostatin안기산135-164적억제활성최위현저.결론:인vasostatin편단중안기산135-164시억제내피세포증식활성교강적편단.
