高等学校化学学报
高等學校化學學報
고등학교화학학보
CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES
2004年
6期
1046-1050
,共5页
张磊亮%焦建伟%邵开峰%俞梅敏%茹炳根
張磊亮%焦建偉%邵開峰%俞梅敏%茹炳根
장뢰량%초건위%소개봉%유매민%여병근
低分子量尿激酶原%抗栓肽%血小板聚集
低分子量尿激酶原%抗栓肽%血小闆聚集
저분자량뇨격매원%항전태%혈소판취집
将抗栓肽(Decorsin)嫁接到低分子量尿激酶原(scuPA-32k)上, 可以期望获得既具有抗血小板聚集活性, 又具有溶栓活性的新型基因工程蛋白质分子. 利用计算机辅助分子设计手段模拟了该融合蛋白的分子结构, 证明其活性区可以正常发挥功能. 根据大肠杆菌偏好密码子合成Decorsin的基因, 与scuPA-32k基因融合在一起, 构建新的嵌合体基因dscuPA, 并在大肠杆菌中通过IPTG进行诱导表达, 该重组蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式存在. 对包涵体进行变性和复性并通过层析纯化得到目的蛋白质. 用纤维蛋白平板法测得重组蛋白的比活为92 000 IU/mg. 激活纤溶酶原的酶促动力学性质与天然低分子量尿激酶相似, 且有较强的抑制血小板聚集的功能. 重组蛋白dscuPA不但具有较强的溶栓功能, 而且具有抗栓功能.
將抗栓肽(Decorsin)嫁接到低分子量尿激酶原(scuPA-32k)上, 可以期望穫得既具有抗血小闆聚集活性, 又具有溶栓活性的新型基因工程蛋白質分子. 利用計算機輔助分子設計手段模擬瞭該融閤蛋白的分子結構, 證明其活性區可以正常髮揮功能. 根據大腸桿菌偏好密碼子閤成Decorsin的基因, 與scuPA-32k基因融閤在一起, 構建新的嵌閤體基因dscuPA, 併在大腸桿菌中通過IPTG進行誘導錶達, 該重組蛋白在大腸桿菌中以包涵體的形式存在. 對包涵體進行變性和複性併通過層析純化得到目的蛋白質. 用纖維蛋白平闆法測得重組蛋白的比活為92 000 IU/mg. 激活纖溶酶原的酶促動力學性質與天然低分子量尿激酶相似, 且有較彊的抑製血小闆聚集的功能. 重組蛋白dscuPA不但具有較彊的溶栓功能, 而且具有抗栓功能.
장항전태(Decorsin)가접도저분자량뇨격매원(scuPA-32k)상, 가이기망획득기구유항혈소판취집활성, 우구유용전활성적신형기인공정단백질분자. 이용계산궤보조분자설계수단모의료해융합단백적분자결구, 증명기활성구가이정상발휘공능. 근거대장간균편호밀마자합성Decorsin적기인, 여scuPA-32k기인융합재일기, 구건신적감합체기인dscuPA, 병재대장간균중통과IPTG진행유도표체, 해중조단백재대장간균중이포함체적형식존재. 대포함체진행변성화복성병통과층석순화득도목적단백질. 용섬유단백평판법측득중조단백적비활위92 000 IU/mg. 격활섬용매원적매촉동역학성질여천연저분자량뇨격매상사, 차유교강적억제혈소판취집적공능. 중조단백dscuPA불단구유교강적용전공능, 이차구유항전공능.
