生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2000年
6期
675-678
,共4页
杨晟%黄鹤%章如安%钱美琴%余有浩%钱雪明%袁中一
楊晟%黃鶴%章如安%錢美琴%餘有浩%錢雪明%袁中一
양성%황학%장여안%전미금%여유호%전설명%원중일
重组人血清白蛋白%Pichia pastoris%α性成熟因子前导肽%高密度发酵
重組人血清白蛋白%Pichia pastoris%α性成熟因子前導肽%高密度髮酵
중조인혈청백단백%Pichia pastoris%α성성숙인자전도태%고밀도발효
为获得高产稳产重组人血清白蛋白的Pichiapastoris细胞株用于高密度发酵,构建了多种分泌表达载体,在Pichiapastoris中作表达,研究表达载体构建等因素对表达量的影响.发现采用酿酒酵母.性成熟因子前导肽比人血清白蛋白天然前导肽作为分泌信号肽的表达量要高10%左右.而载体整合方式、整合拷贝数、5'非翻译区的改造和甲醇利用表型等对表达量无规律性影响.筛选到的高表达株经高密度发酵,细胞湿重达460g/L,发酵液上清的人血清白蛋白含量为1.0g/L.
為穫得高產穩產重組人血清白蛋白的Pichiapastoris細胞株用于高密度髮酵,構建瞭多種分泌錶達載體,在Pichiapastoris中作錶達,研究錶達載體構建等因素對錶達量的影響.髮現採用釀酒酵母.性成熟因子前導肽比人血清白蛋白天然前導肽作為分泌信號肽的錶達量要高10%左右.而載體整閤方式、整閤拷貝數、5'非翻譯區的改造和甲醇利用錶型等對錶達量無規律性影響.篩選到的高錶達株經高密度髮酵,細胞濕重達460g/L,髮酵液上清的人血清白蛋白含量為1.0g/L.
위획득고산은산중조인혈청백단백적Pichiapastoris세포주용우고밀도발효,구건료다충분비표체재체,재Pichiapastoris중작표체,연구표체재체구건등인소대표체량적영향.발현채용양주효모.성성숙인자전도태비인혈청백단백천연전도태작위분비신호태적표체량요고10%좌우.이재체정합방식、정합고패수、5'비번역구적개조화갑순이용표형등대표체량무규률성영향.사선도적고표체주경고밀도발효,세포습중체460g/L,발효액상청적인혈청백단백함량위1.0g/L.
