中国科学C辑
中國科學C輯
중국과학C집
SCIENCE IN CHINA (SERIES C)
1999年
2期
209-216
,共8页
马学军%胡荣%吕海%魏开坤%张丽兰%薛水星%侯云德
馬學軍%鬍榮%呂海%魏開坤%張麗蘭%薛水星%侯雲德
마학군%호영%려해%위개곤%장려란%설수성%후운덕
噬菌体表面显示%肽库%人α1型干扰素
噬菌體錶麵顯示%肽庫%人α1型榦擾素
서균체표면현시%태고%인α1형간우소
利用噬菌体表面显示技术表达具生物活性的干扰素α1c,并通过构建和筛选突变文库,以得到高受体结合能力和高比活性的新α1c干扰素. 利用噬菌粒载体pCANTAB5E表达了人IFNα1c/86D基因,利用随机6肽库和干扰素的中和抗体推导干扰素α1c的受体结合区及关键性结合残基,运用盒式突变构建了基于AB环的突变库,其中氨基酸29,31,32,35位完全随机化,并直接利用WISH细胞选择出高抗病毒活性的干扰素突变体. 结果获得了3个重组噬菌体干扰素突变体,其抗病毒活性是干扰素母体的4～16倍. 这一结果为国内外首次报道利用噬菌体表面显示技术的筛选表达优势改造干扰素以提高抗病毒活性,实验结果说明了其可行性, 并提示干扰素突变体的比活性有可能较母体高.
利用噬菌體錶麵顯示技術錶達具生物活性的榦擾素α1c,併通過構建和篩選突變文庫,以得到高受體結閤能力和高比活性的新α1c榦擾素. 利用噬菌粒載體pCANTAB5E錶達瞭人IFNα1c/86D基因,利用隨機6肽庫和榦擾素的中和抗體推導榦擾素α1c的受體結閤區及關鍵性結閤殘基,運用盒式突變構建瞭基于AB環的突變庫,其中氨基痠29,31,32,35位完全隨機化,併直接利用WISH細胞選擇齣高抗病毒活性的榦擾素突變體. 結果穫得瞭3箇重組噬菌體榦擾素突變體,其抗病毒活性是榦擾素母體的4～16倍. 這一結果為國內外首次報道利用噬菌體錶麵顯示技術的篩選錶達優勢改造榦擾素以提高抗病毒活性,實驗結果說明瞭其可行性, 併提示榦擾素突變體的比活性有可能較母體高.
이용서균체표면현시기술표체구생물활성적간우소α1c,병통과구건화사선돌변문고,이득도고수체결합능력화고비활성적신α1c간우소. 이용서균립재체pCANTAB5E표체료인IFNα1c/86D기인,이용수궤6태고화간우소적중화항체추도간우소α1c적수체결합구급관건성결합잔기,운용합식돌변구건료기우AB배적돌변고,기중안기산29,31,32,35위완전수궤화,병직접이용WISH세포선택출고항병독활성적간우소돌변체. 결과획득료3개중조서균체간우소돌변체,기항병독활성시간우소모체적4～16배. 저일결과위국내외수차보도이용서균체표면현시기술적사선표체우세개조간우소이제고항병독활성,실험결과설명료기가행성, 병제시간우소돌변체적비활성유가능교모체고.
