微生物学杂志
微生物學雜誌
미생물학잡지
JOURNAL OF MICROBIOLOGY
2003年
2期
21-22,25
,共3页
幽门螺杆菌%flaA基因%克隆%表达%免疫性
幽門螺桿菌%flaA基因%剋隆%錶達%免疫性
유문라간균%flaA기인%극륭%표체%면역성
采用高保真PCR从幽门螺杆菌Y06株DNA中扩增全长flaA基因片段,T-A克隆后测定核苷酸序列,构建pET32a的flaA表达载体,在E.coli BL21DE3宿主菌中用不同浓度的IPTG诱导表达,采用Hp全菌抗体的western blot和兔抗融合蛋白血清的免疫扩散试验鉴定其免疫性.所克隆的flaA基因核苷酸和氨基酸序列与文献报道的同源性分别为96.28%～97.13%和99.41%～100%.pET32a-flaA-BL21DE3系统表达的FlaA融合蛋白量高达细菌总蛋白的40%～50%.FlaA融合蛋白能与Hp全菌抗体及家兔免疫血清发生结合反应.
採用高保真PCR從幽門螺桿菌Y06株DNA中擴增全長flaA基因片段,T-A剋隆後測定覈苷痠序列,構建pET32a的flaA錶達載體,在E.coli BL21DE3宿主菌中用不同濃度的IPTG誘導錶達,採用Hp全菌抗體的western blot和兔抗融閤蛋白血清的免疫擴散試驗鑒定其免疫性.所剋隆的flaA基因覈苷痠和氨基痠序列與文獻報道的同源性分彆為96.28%～97.13%和99.41%～100%.pET32a-flaA-BL21DE3繫統錶達的FlaA融閤蛋白量高達細菌總蛋白的40%～50%.FlaA融閤蛋白能與Hp全菌抗體及傢兔免疫血清髮生結閤反應.
채용고보진PCR종유문라간균Y06주DNA중확증전장flaA기인편단,T-A극륭후측정핵감산서렬,구건pET32a적flaA표체재체,재E.coli BL21DE3숙주균중용불동농도적IPTG유도표체,채용Hp전균항체적western blot화토항융합단백혈청적면역확산시험감정기면역성.소극륭적flaA기인핵감산화안기산서렬여문헌보도적동원성분별위96.28%～97.13%화99.41%～100%.pET32a-flaA-BL21DE3계통표체적FlaA융합단백량고체세균총단백적40%～50%.FlaA융합단백능여Hp전균항체급가토면역혈청발생결합반응.
